甲狀旁腺激素促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和干細(xì)胞干性的作用機(jī)制研究.pdf

1、卵巢是女性重要的生殖器官之一，卵巢惡性腫瘤是致死率最高的婦科腫瘤，卵巢癌患者死亡人數(shù)占女性癌癥患者死亡人數(shù)的4％。甲狀旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）是由人甲狀旁腺主細(xì)胞合成并分泌的重要的多肽類激素，它在體內(nèi)的主要作用是調(diào)節(jié)鈣磷代謝和骨轉(zhuǎn)換。本文從PTH對卵巢癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）和干細(xì)胞干性的影響入手，探究PTH在卵巢癌細(xì)胞中的作用機(jī)制

2、。
　　本研究發(fā)現(xiàn)，PTH體外作用卵巢癌細(xì)胞SKOV3、ES2后可顯著提高細(xì)胞的增殖能力。愈傷劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)以及Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，PTH處理后細(xì)胞的遷移和侵襲能力顯著提高，表明PTH具有促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的作用。檢測卵巢癌細(xì)胞內(nèi)EMT標(biāo)志物的表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，PTH處理提高了細(xì)胞內(nèi)間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物N-Cadherin、Vimentin的表達(dá)，上皮細(xì)胞標(biāo)志物E-Cadheri

3、n表達(dá)量降低，EMT相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子Twist、Snail的表達(dá)量也增加，證實(shí)PTH具有促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞EMT的作用。
　　微球形成實(shí)驗(yàn)和平板克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，PTH處理卵巢癌細(xì)胞后，細(xì)胞的自我更新能力顯著增強(qiáng)，微球形成和平板克隆形成能力顯著提高。檢測細(xì)胞內(nèi)的干細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，干細(xì)胞標(biāo)志物Bmi-1、Sox-2、Oct-4以及轉(zhuǎn)錄因子Slug、Nanong表達(dá)量均提高，表明PTH增強(qiáng)了卵巢癌細(xì)胞的干細(xì)胞干性。
　　

4、在原位腫瘤動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中，PTH處理組的腫瘤體積和重量顯著高于對照組，表明PTH在體內(nèi)具有促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞腫瘤形成和促進(jìn)腫瘤生長的作用。
　　為了探究PTH在卵巢癌細(xì)胞中的作用機(jī)制，本研究用抑制劑GSI-953阻斷Notch3信號通路或用siRNA內(nèi)源性降低Notch3表達(dá)，PTH促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞EMT和干細(xì)胞干性的作用被減弱或抑制，而阻斷其他信號通路則對PTH的作用無顯著影響，表明PTH主要通過Notch3信號通路介導(dǎo)發(fā)揮作用。綜上