β抑制蛋白2及微管相關(guān)蛋白LC3在腎臟缺血再灌注損傷中的改變及意義.pdf

1、目的:
　　探討微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)及β抑制蛋白2(β-arrestin2)在急性腎臟缺血再灌注損傷中的表達(dá)及與腎臟損害程度的相關(guān)性。
　　方法:
　　選用生后3-4周的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為正常對照組（C組）、假手術(shù)組(S組)、急性缺血再灌注損傷組（IRI組）。正常對照組不做特殊處置，取腎臟及血液樣本;假手術(shù)組行右側(cè)腎臟切除術(shù)，并在縫合切口后24h、48h取腎臟及血液樣本;實(shí)驗(yàn)組通過右側(cè)腎臟切除，無創(chuàng)動脈夾夾

2、閉左側(cè)腎動脈45min之后松開動脈夾，恢復(fù)腎臟血流，建立腎臟急性缺血再灌注損傷模型，并在恢復(fù)腎臟血流后12h、24h、36h、48h、72h、96h取腎臟及血液樣本。采用免疫組織化學(xué)方法及western blot方法檢測各組腎組織中β-arrestin2及LC3的表達(dá)水平，檢測各組的腎功能，并對各組腎臟病理進(jìn)行評分。對各組結(jié)果的比較分析采用單因素方差分析及LSD-t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　缺血再灌注損傷組血肌酐值及腎臟病理評

3、分均有顯著升高，并且隨再灌注時(shí)間的改變兩者均呈先升高后降低的趨勢，其中以24h腎臟損傷程度最為明顯，與對照組及假手術(shù)組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而正常組、假手術(shù)組之間無顯著差異(P＞0.05)。免疫組化結(jié)果表明LC3蛋白及β-arrestin2蛋白均表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞的胞質(zhì)中，其中擴(kuò)張的腎小管上皮細(xì)胞中表達(dá)較多。免疫組化及western blot結(jié)果均提示缺血再灌注損傷組上述兩種蛋白的表達(dá)量較高，其中以缺血再灌注損傷后

4、12h為著，隨著缺血再灌注時(shí)間的延長，表達(dá)量逐漸降低。缺血再灌注損傷組的大部分時(shí)間點(diǎn)(12h、24h、36h、48h)的表達(dá)量與正常對照組和假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而正常對照組、假手術(shù)組表達(dá)量低，兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。此外，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明β-arrestin2及LC3的表達(dá)改變先于腎臟病理改變，并且與腎臟損害程度成正相關(guān)(r=0.821，p＜0.05; r=0.913, p＜0.05)。