解偶聯(lián)蛋白1在小鼠腎臟缺血再灌注損傷的作用.pdf

1、一、C57BL小鼠腎臟IRI模型的建立與觀察
　　目的:能夠成功建立IRI損傷模型，對C57BL/6小鼠出現(xiàn)的腎功能損傷和病理形態(tài)作初步的觀察與評定。
　　方法:40只C57BL小鼠，滿足實驗指標，隨機選擇30只C57小鼠作為手術(shù)組，建立損傷模型;剩下的10只小鼠作為對照組。術(shù)后對C57小鼠腎功能進行評估，小鼠腎損傷通過腎臟標本進行蘇木精-伊紅染色來觀察，并初步評定損傷級別:輕度、中度、重度，最后觀察手術(shù)成功率，評定建模方法

2、穩(wěn)定性。
　　結(jié)果:實驗組C57BL小鼠術(shù)后存活率為93.33％，蘇木精-伊紅染色結(jié)果顯示腎小管等的損傷，評定IRI損傷為輕中度。血肌酐相比對照組升高明顯，腎功能損害。
　　結(jié)論:C57BL小鼠手術(shù)成功率高，建模方法穩(wěn)定可用，腎功能下降，染色病理損傷觀察明顯和作出評定，并初步完成C57BL小鼠IRI損傷的初步研究。
　　二、UCP1在小鼠腎臟缺血再灌注損傷的作用
　　目的:觀察比較UCP1缺陷小鼠腎臟的IRI以及

3、確定UCP1作用。
　　方法:UCP1缺陷小鼠，雄性，6至8周，20-25g，20只作為實驗組(UCP1組)，C57小鼠，雄性，6至8周，20-25g，20只作為對照組(C57組)，利用第一部分所采用的手術(shù)方式來構(gòu)建損傷模型，實驗術(shù)后24小時評定兩組小鼠腎功能變化，采集實驗組和對照組的血清和腎臟標本，通過蘇木精-伊紅染色腎臟標本，腎臟病理染色后觀察腎臟改變并評定損傷等級。所有測定標本統(tǒng)一時間測定數(shù)值。
　　實驗結(jié)果:UCP1

4、組（168.1±36.56、57.12±4.81）的血肌酐、尿素氮均高于對照C57組（60.99±11.16、36.38±5.21），具有統(tǒng)計學差異。另外UCP1缺陷小鼠病理損傷比C57小鼠更加嚴重，損傷評定級別升高。
　　實驗結(jié)論:UCP1缺陷的情況下IRI在小鼠腎臟中更加嚴重，所以UCP1能減輕這種損傷。
　　三、研究UCP1缺陷小鼠腎臟IRI損傷加重機制
　　目的:初步明確UCP1缺陷條件下存在的損傷機理

5、　　方法:第二部分實驗結(jié)果及相關(guān)的研究表明ROS可能導致了炎癥反應更加的嚴重，利用對經(jīng)典的炎癥標記物TNF-α來衡量腎臟的炎癥水平，第二部分所收集的標本（-80℃冰箱保存）進行RT-PCR檢測TNF-α的含量檢測。
　　實驗結(jié)果:UCP1組TNF-α表達水平（3.65±0.052），C57組TNF-α表達水平（1.65±0.048），具有統(tǒng)計學差異。
　　結(jié)論探討:在UCP1缺陷小鼠的腎臟中TNF-α表達水平明顯高于C57小