解偶聯(lián)蛋白1在小鼠腎臟缺血再灌注損傷的作用.pdf

1、一、C57BL小鼠腎臟IRI模型的建立與觀察
　　目的:能夠成功建立IRI損傷模型，對(duì)C57BL/6小鼠出現(xiàn)的腎功能損傷和病理形態(tài)作初步的觀察與評(píng)定。
　　方法:40只C57BL小鼠，滿足實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，隨機(jī)選擇30只C57小鼠作為手術(shù)組，建立損傷模型;剩下的10只小鼠作為對(duì)照組。術(shù)后對(duì)C57小鼠腎功能進(jìn)行評(píng)估，小鼠腎損傷通過(guò)腎臟標(biāo)本進(jìn)行蘇木精-伊紅染色來(lái)觀察，并初步評(píng)定損傷級(jí)別:輕度、中度、重度，最后觀察手術(shù)成功率，評(píng)定建模方法

2、穩(wěn)定性。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組C57BL小鼠術(shù)后存活率為93.33％，蘇木精-伊紅染色結(jié)果顯示腎小管等的損傷，評(píng)定IRI損傷為輕中度。血肌酐相比對(duì)照組升高明顯，腎功能損害。
　　結(jié)論:C57BL小鼠手術(shù)成功率高，建模方法穩(wěn)定可用，腎功能下降，染色病理?yè)p傷觀察明顯和作出評(píng)定，并初步完成C57BL小鼠IRI損傷的初步研究。
　　二、UCP1在小鼠腎臟缺血再灌注損傷的作用
　　目的:觀察比較UCP1缺陷小鼠腎臟的IRI以及

3、確定UCP1作用。
　　方法:UCP1缺陷小鼠，雄性，6至8周，20-25g，20只作為實(shí)驗(yàn)組(UCP1組)，C57小鼠，雄性，6至8周，20-25g，20只作為對(duì)照組(C57組)，利用第一部分所采用的手術(shù)方式來(lái)構(gòu)建損傷模型，實(shí)驗(yàn)術(shù)后24小時(shí)評(píng)定兩組小鼠腎功能變化，采集實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的血清和腎臟標(biāo)本，通過(guò)蘇木精-伊紅染色腎臟標(biāo)本，腎臟病理染色后觀察腎臟改變并評(píng)定損傷等級(jí)。所有測(cè)定標(biāo)本統(tǒng)一時(shí)間測(cè)定數(shù)值。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:UCP1

4、組（168.1±36.56、57.12±4.81）的血肌酐、尿素氮均高于對(duì)照C57組（60.99±11.16、36.38±5.21），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。另外UCP1缺陷小鼠病理?yè)p傷比C57小鼠更加嚴(yán)重，損傷評(píng)定級(jí)別升高。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)論:UCP1缺陷的情況下IRI在小鼠腎臟中更加嚴(yán)重，所以UCP1能減輕這種損傷。
　　三、研究UCP1缺陷小鼠腎臟IRI損傷加重機(jī)制
　　目的:初步明確UCP1缺陷條件下存在的損傷機(jī)理

5、　　方法:第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相關(guān)的研究表明ROS可能導(dǎo)致了炎癥反應(yīng)更加的嚴(yán)重，利用對(duì)經(jīng)典的炎癥標(biāo)記物TNF-α來(lái)衡量腎臟的炎癥水平，第二部分所收集的標(biāo)本（-80℃冰箱保存）進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)TNF-α的含量檢測(cè)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:UCP1組TNF-α表達(dá)水平（3.65±0.052），C57組TNF-α表達(dá)水平（1.65±0.048），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論探討:在UCP1缺陷小鼠的腎臟中TNF-α表達(dá)水平明顯高于C57小