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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠腎臟缺血再灌注損傷(IRI)模型觀察大鼠血中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)的水平,旨在為臨床上急性腎損傷患者的早期診斷提供一定的理論依據(jù)。
方法:將50只SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(S組,25只)和模型組(M組,25只),每組分2h、6h、12h、24h及48h五個(gè)亞組。M組大鼠采用雙側(cè)腎動(dòng)脈夾閉30min建立腎臟IRI模型,術(shù)中大鼠體溫保持在37℃。分別于各時(shí)間點(diǎn)麻醉大鼠,經(jīng)下腔靜脈采血
2、約5ml,離心后將標(biāo)本凍存于-70℃冰箱;血NGAL測(cè)定采用ELISA法,血清肌酐(Scr)采用苦味酸法,尿素氮(BUN)采用二乙酰肟法。將雙腎標(biāo)本固定于10%甲醛溶液中,以備蘇木素-伊紅染色,觀察腎臟病理變化。
結(jié)果:M組NGAL于造模后2h出現(xiàn)升高,至24h達(dá)高峰,較組內(nèi)其他亞組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,于48h略有下降,但仍高于S組(p<0.05);BUN于造模后6h升高至48h達(dá)高峰(p<0.01);而Scr則于損傷后48h才出現(xiàn)
3、升高(p<0.05)。S組各檢測(cè)指標(biāo)各時(shí)間點(diǎn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。光鏡觀察:M組腎小管上皮細(xì)胞水腫較為普遍,伴刷狀緣消失、管腔明顯擴(kuò)張,管腔內(nèi)可見細(xì)胞碎屑,為壞死、脫落的小管上皮細(xì)胞;至12h時(shí)可見間質(zhì)水腫壓迫致管腔明顯狹窄;蛋白管型于6h出現(xiàn),至24h、48h時(shí)顯著增多。
結(jié)論:
(1)血NGAL的水平于再灌注后早期即出現(xiàn)增高,明顯早于Scr,提示NGAL可作為腎臟缺血再灌注損傷早期的生物學(xué)標(biāo)志物。
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