廣西環(huán)江產(chǎn)鐵皮石斛內(nèi)生真菌的分離鑒定及其生物活性的研究.pdf

1、鐵皮石斛(Dendrobium candidum)為蘭科石斛屬多年生附生草本植物，是被藥典收錄的5種石斛屬植物之一，被譽(yù)為石斛類中的極品，其有效成分主要為石斛多糖、石斛堿和氨基酸等，其中石斛多糖含量高21.7％，能顯著提高機(jī)體免疫功能，具有養(yǎng)胃出津、補(bǔ)腎益力、滋陰清熱、耐缺氧、抗疲勞、抗腫瘤等功效。本論文利用組織分離法、菌片法對采自廣西環(huán)江縣木倫國家自然保護(hù)區(qū)的野生鐵皮石斛(Dendrobium candidum)內(nèi)生真菌的種類及其生物

2、活性進(jìn)行了初步研究。結(jié)果如下： 1、利用組織分離法首次從廣西環(huán)江產(chǎn)鐵皮石斛的根中分離到37株內(nèi)生真菌。以經(jīng)典形態(tài)學(xué)分類方法，采用薩卡圖(Samardo)和休斯-塔巴基-巴倫(Hugues-Tubaki-Barron)真菌分類系統(tǒng)對分離獲得的37株內(nèi)生真菌進(jìn)行顯微形態(tài)特征的觀察和鑒定，共鑒定出4株產(chǎn)孢的內(nèi)生真菌，分別屬于鐮胞菌屬、頭孢霉屬和擬小卵孢屬，其余33株內(nèi)生真菌在本試驗(yàn)條件下不產(chǎn)生孢子，為無孢類群，占總分離菌數(shù)的89.2％

3、。對33株不產(chǎn)孢的菌株進(jìn)行了rDNA ITS序列測序，并與GeneBank中序列相似性較高的已知菌株進(jìn)行了比較分析，確定了序列相似性高的30個菌株的分類地位。 2、在所得的37株內(nèi)生真菌中，共篩選出7株對鐵皮石斛組培苗有促生長作用的菌株。7個菌株對鐵皮石斛組培苗的多糖含量均有較大的影響。與對照相比，組培苗的多糖含量最高能提高76.5％。 3、選用大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphyl

4、ococcusaureus)、枯草芽胞桿菌(Bacillus subtills)、白色念珠菌(Candidaalbicams)、新型隱球酵母菌(Cryptococcus neoformans Vuillemin)和煙曲霉(Aspergillus fumigatus Fresenius)，分別代表了G+、G-及真菌，對獲得的37株內(nèi)生真菌進(jìn)行了抗菌活性的篩選。結(jié)果表明，有18株內(nèi)生真菌對至少1種試驗(yàn)菌株有抗菌活性，占總分離菌株的34.6％