蟲(chóng)草素的分離鑒定及其生物活性研究.pdf

1、蟲(chóng)草素，即3’-脫氧腺苷，具有抑菌、抗腫瘤、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)等藥理活性，無(wú)論在醫(yī)療還是在保健食品方面，蟲(chóng)草素都具有巨大的開(kāi)發(fā)價(jià)值。本文以蛹蟲(chóng)草子實(shí)體為研究對(duì)象，從中分離出單一活性成分蟲(chóng)草素，并對(duì)其抗氧化、抗HIV-1，免疫調(diào)節(jié)作用等進(jìn)行了深入的研究。
　　蛹蟲(chóng)草子實(shí)體經(jīng)石油醚脫脂、乙醇浸提、NKA-Ⅱ大孔樹(shù)脂富集、HPLC分離和制備，最終得到純度為98.5％的蟲(chóng)草素。經(jīng)高分辨率質(zhì)譜檢測(cè)和核磁氫譜、碳譜結(jié)果分析以及HPLC分析可確定

2、所得樣品為蟲(chóng)草素單一組分。
　　抗氧化活性方面，蟲(chóng)草素能明顯抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，100μg/mL時(shí)抑制率為48.7%，同一濃度下，小鼠紅細(xì)胞溶血抑制率為25.73%，而在清除O2-·自由基、HO·自由基、DPPH自由基方面，效果不太明顯；在E. coliBL21( pET-croGFP)這一模型中，蟲(chóng)草素濃度為200μg/mL時(shí)，抑制H2O2誘發(fā)的胞內(nèi)氧化水平升高的能力為51.42%；蟲(chóng)草素還能顯著提高氧化應(yīng)激模型小鼠體內(nèi)的GSH水平

3、、GSH-Px酶活力以及小鼠腦脂質(zhì)過(guò)氧化抑制活性，極顯著提高SOD酶活力，以及小鼠紅細(xì)胞溶血抑制活性。
　　在抑制HIV-1病毒復(fù)制方面，通過(guò)檢測(cè)在假病毒加入前和加入后2 h加藥這兩個(gè)時(shí)間段得知，蟲(chóng)草素能夠抑制 HIV-1假病毒進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)低濃度的蟲(chóng)草素對(duì)于整合酶的抑制活性更強(qiáng)，而對(duì)于蛋白酶的抑制，則是高濃度的蟲(chóng)草素作用更強(qiáng)，在100μg/mL時(shí)抑制率高于正對(duì)照，達(dá)到23%左右?？寡趸c抗HIV-1雙檢測(cè)模型TZM-BL(pcD

4、NA3.1-croGFP)中，一方面，蟲(chóng)草素在一定程度上可以抑制 H2O2引起的氧化應(yīng)激，另一方面，還能夠有效的抑制 HIV-1假病毒感染TZM-BL細(xì)胞引起LTR的激活作用，從而抑制病毒的復(fù)制。
　　蟲(chóng)草素還能顯著上調(diào)Th1型細(xì)胞因子IFN-γ，并下調(diào)IL-4和IL-10等Th2型細(xì)胞因子的表達(dá)水平。綜上，本研究從蛹蟲(chóng)草中分離出蟲(chóng)草素單一組分，從抗氧化、抗HIV-1以及免疫調(diào)節(jié)等方面探究其生物活性，并對(duì)其抗氧化和抗HIV-1之間