腦梗死合并細菌性肺炎大鼠模型建立及清熱化痰通腑方對模型大鼠腸道菌群的影響.pdf

1、目的：
　　通過改良線栓法分別結(jié)合滴鼻法、經(jīng)口腔氣管插管法和氣管注射法三種不同細菌接種方法建立腦梗死合并細菌性肺炎大鼠模型，擇優(yōu)選取動物模型，觀察模型大鼠外周血白細胞計數(shù)、中性粒細胞百分比、肺組織病理和腸道菌群的變化，以及清熱化痰通腑方灌腸治療對上述指標的影響，初步探討清熱化痰通腑方治療腦梗死合并細菌性肺炎的可能作用機制。
　　方法：
　　1、SPF級雄性SD大鼠76只，均采用改良線栓法建立腦梗死模型，進行Longa評

2、分后，隨機選取4只腦梗死模型大鼠斷頭取腦組織行TTC染色，其余72只腦梗死模型大鼠采用隨機數(shù)字表法分為滴鼻組（D組）、經(jīng)口腔氣管插管組（K組）、氣管注射組（Q組）和腦梗死對照組（N組），共四個大組，每組均18只;四個大組根據(jù)處理時間均分為1d、3d、7d三個亞組，每個亞組各6只。D、K、Q三組在腦梗死模型的基礎(chǔ)上再分別采用滴鼻法、經(jīng)口腔氣管插管法和氣管注射法接種0.2ml銅綠假單胞菌菌懸液誘發(fā)細菌性肺炎，從而建立腦梗死合并細菌性肺炎大鼠

3、模型。觀察各組大鼠一般生活狀態(tài)、體溫、體重、外周血白細胞計數(shù)和中性粒細胞百分比、肺組織細菌學(xué)和病理學(xué)等變化，比較分析及評價三種造模方法所建模型的質(zhì)量。
　　2、SPF級雄性SD大鼠30只，按照隨機數(shù)字表法分為空白對照組、模型組、高劑量中藥灌腸組（簡稱高劑量組）、中劑量中藥灌腸組（簡稱中劑量組）、低劑量中藥灌腸組（簡稱低劑量組），每組均6只。擇優(yōu)方法建立腦梗死合并細菌性肺炎大鼠模型，高劑量組、中劑量組和低劑量組分別予高、中、低劑量清

4、熱化痰通腑方灌腸治療，每天1次，連續(xù)7d;模型組、空白對照組不予任何處理。7d后觀察各組大鼠一般狀態(tài)、體重和體溫變化;用全自動血液分析儀檢測各組大鼠外周血白細胞計數(shù)及中性粒細胞百分比;HE染色觀察各組大鼠肺組織病理改變;細菌學(xué)檢測各組大鼠肺組織銅綠假單胞菌計數(shù)和腸道菌群的變化。
　　結(jié)果：
　　1、采用改良線栓法分別結(jié)合滴鼻法、經(jīng)口腔氣管插管法和氣管注射法三種方法建立腦梗死合并細菌性肺炎大鼠模型，各造模組大鼠各項指標的改變程

5、度不同:在一般狀態(tài)表現(xiàn)方面，D組大鼠一般狀態(tài)稍差，K、Q兩組大鼠一般狀態(tài)較差;在體重變化方面，K組大鼠造模后第7d體重下降(P＜0.05)，Q組大鼠造模后第1、3、7d體重均顯著下降(P＜0.01)，D組大鼠體重下降不明顯(P＞0.05);在體溫、外周血白細胞計數(shù)和中性粒細胞百分比變化方面，D組大鼠造模后第3、7d體溫、外周血白細胞計數(shù)及中性粒細胞百分比均升高(P＜0.05或P＜0.01)，K、Q兩組大鼠造模后第1、3、7d體溫、外周血

6、白細胞計數(shù)及中性粒細胞百分比均顯著升高(P＜0.05或P＜0.01);在肺組織病理學(xué)改變方面，D、K、Q三組大鼠造模后第1、3、7d肺組織均有炎性改變;在造模成功率方面，Q組造模成功率最高。
　　2、與空白對照組比較，模型組大鼠一般狀態(tài)差，體重顯著降低(P＜0.01)，體溫、外周血白細胞計數(shù)及中性粒細胞百分比顯著升高(P＜0.01)。藥物干預(yù)7d后，與模型組比較，高劑量組大鼠一般狀態(tài)良好，體重顯著增加(P＜0.01)，體溫、外周血

7、白細胞計數(shù)及中性粒細胞百分比顯著降低(P＜0.01)，與空白對照組比較無明顯差異(P＞0.05);中劑量組和低劑量組大鼠一般狀態(tài)較好，體重增加(P＜0.01)，體溫、外周血白細胞計數(shù)及中性粒細胞百分比均降低(P＜0.05)，但仍均高于空白對照組(P＜0.05)。
　　3、模型組大鼠肺泡水腫、充血明顯，肺泡間質(zhì)增寬，伴有大量炎性細胞浸潤。高劑量組大鼠肺泡水腫、充血不明顯，肺泡間質(zhì)未見明顯增寬，伴少量散在炎性細胞浸潤;中劑量組和低劑量

8、組大鼠肺泡均水腫、充血明顯，肺泡間質(zhì)增寬，伴中量炎性細胞浸潤。
　　4、空白對照組大鼠肺組織勻漿均未培養(yǎng)出銅綠假單胞菌;模型組大鼠肺組織勻漿均培養(yǎng)出銅綠假單胞菌。藥物干預(yù)7d后，與模型組比較，高劑量組大鼠肺組織勻漿培養(yǎng)的銅綠假單胞菌活菌數(shù)減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;中劑量組和低劑量組大鼠肺組織勻漿培養(yǎng)的銅綠假單胞菌活菌數(shù)均減少，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　5、與空白對照組比較，模型組大鼠腸道需氧菌

9、、厭氧菌、大腸桿菌和腸球菌明顯增多(P＜0.05或P＜0.01)，乳酸桿菌明顯減少（P＜0.01）。藥物干預(yù)7d后，與模型組比較，高劑量組大鼠腸道厭氧菌和大腸桿菌明顯減少(P＜0.05或P＜0.01)，乳酸桿菌明顯增加(P＜0.01);中劑量組和低劑量組大鼠腸道乳酸桿菌明顯增加(P＜0.01)，余腸道菌群變化差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、改良線栓法結(jié)合氣管注射法建立的腦梗死合并細菌性肺炎大鼠模型，