實時熒光定量PCR技術(shù)在侵襲性真菌感染診斷中的價值.pdf

1、目的：本研究將實時熒光定量PCR技術(shù)（Real-time Flurescent Quantitive Polymerase Chain Reaction，RTFQ-PCR）應(yīng)用于侵襲性真菌感染（Invasive fungal infection IFI）的早期診斷，旨在評價RTFQ-PCR技術(shù)在IFI早期診斷中的應(yīng)用價值，為早期診斷與治療IFI提供依據(jù)。
　　方法：1、采集寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院及心腦血管病醫(yī)院ICU科2015年5月至

2、2016年3月IFI高危患者102份血清,同時收集其相關(guān)臨床資料。
　　2、送檢血培養(yǎng)、G試驗。
　　3、RTFQ-PCR檢測：①提取白色念珠菌DNA，經(jīng)PCR擴增出目的基因片段并回收，然后倍比稀釋,分別計算出拷貝數(shù)，最后經(jīng)RTFQ-PCR檢測，由軟件繪制出標準曲線。②提取IFI高危患者血清中的DNA,進行RTFQ-PCR檢測,收集實驗數(shù)據(jù)。
　　4、根據(jù)“重癥患者IFI的診斷和治療指南（2007年）”制定的診斷標準，

3、將納入的研究對象分為：確診IFI、臨床診斷IFI、擬診IFI及非IFI。將“2007年指南”作為金標準，以確診和臨床診斷病例作為感染組，非IFI病例作為非感染組，將感染組和非感染組分別作為陽性對照病例和陰性對照病例，計算RTFQ-PCR和G試驗的敏感度(Sensitivity Se)、特異度(Specificity Sp)、陽性預(yù)測值(Positive predictive value PPV)、陰性預(yù)測值(Negative predi

4、ctive value NPV)，分析評價RTFQ-PCR在IFI早期診斷中的應(yīng)用價值。
　　5、以血培養(yǎng)為金標準，將血培養(yǎng)陽性作為陽性對照病例，血培養(yǎng)陰性做為陰性對照病例，計算RTFQ-PCR的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。
　　結(jié)果：1、本次研究收集了102份標本，最終共納入99份標本做為研究對象，其中，確診IFI病例2例，臨床診斷IFI病例20例，擬診IFI病例28例，非IFI病例49例。以“2007年指南”

5、作為金標準，計算RTFQ-PCR的敏感度為50％，特異度為96%，陽性預(yù)測值為82%，陰性預(yù)測值為84%；G試驗的敏感度為54%，特異性為92%，陽性預(yù)測值為76%，陰性預(yù)測值為80%；聯(lián)合應(yīng)用RTFQ-PCR和G試驗的敏感度為78%，特異度為88%，陽性預(yù)測值為70%，陰性預(yù)測值為91%。
　　2、以血培養(yǎng)為金標準，計算RTFQ-PCR的敏感度為100%，特異度為88%，陽性預(yù)測值為15%，陰性預(yù)測值為100%。
　　結(jié)論