實時熒光定量PCR檢測HCMV-DNA對小兒HCMV活動性感染診斷的評價.pdf

1、目的：應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測尿液HCMV-DNA，通過與細胞培養(yǎng)法分離尿液HCMV、ELISA法檢測血漿HCMV-IgM抗體比較，評價該法對診斷小兒HCMV活動性感染的價值。 方法： 使用實時熒光定量PCR體系，檢測與HCMV相關(guān)的呼吸道合胞病毒、腺病毒、單純皰疹病毒培養(yǎng)標(biāo)本、對照組20例幼兒標(biāo)本，檢驗該方法的可靠性：對臨床29例肺炎患兒和11例唇腭裂患兒，同時用實時熒光定量PCR法檢測尿液HCMV-DNA、細胞培養(yǎng)

2、法分離HCMV，ELISA法檢測血漿HCMV-IgM抗體三種方法檢測，經(jīng)過統(tǒng)計處理，比較它們結(jié)果之間的差異，比較它們陽性檢出率之間的差異。對40份臨床患兒還進行了血液自細胞計數(shù)和尿蛋白定性。 結(jié)果： (1) 該實時熒光定量PCR體系檢測HCMV-DNA，與相關(guān)的三種病毒無交叉反應(yīng)，20例正常幼兒皆為陰性(<100 copies/m1)。 (2) 40例臨床患兒實時熒光定量PCR檢測尿液HCMV-DNA，陽性10例

3、。其中，唇腭裂組陽性6例(6/11)，肺炎組陽性4例(4/29)，兩組檢出率比較，差異有顯著性(x2=5.06，P<0.05)，唇腭裂組陽性檢出率高于肺炎組。 (3) 40例臨床患兒ELISA法檢測血漿HCMV-IgM抗體，陽性8例。其中，唇腭裂組陽性6例(6/11)，肺炎組陽性2例(2/29)，兩組檢出率比較，差異有顯著性(X2=8.53，P<0.05)，唇腭裂組陽性檢出率高于肺炎組。ELISA法檢測血漿HCMv/-IgG，陽

4、性34例，陽性率為85％，兩組HCMV-IgG檢出率比較，差異無顯著性(X2=3.37，P>0.05)。 (4) 40例臨床患兒HCMV細胞培養(yǎng)法分離病毒，陽性8例，其中，唇腭裂組陽性4例(4/11),肺炎組陽性為4例(4/29),兩組檢出率比較，差異無顯著性(X2=1.21，P>0.05)。 (5) 40例臨床患兒，實時熒光定量PCR檢測尿液HCMV-DNA與細胞培養(yǎng)法分離病毒結(jié)果符合度比較，差異無顯著性(x2=3.33，P>

5、0.05);實時熒光定量PCR法檢測尿液HCMV-DNA與ELISA法檢測血漿HCMV-IgM結(jié)果符合度比較，差異有顯著性(x2=7.5，P<0.05);ELISA法檢測血漿HCMV-IgM與細胞培養(yǎng)法分離病毒結(jié)果符合度比較，差異有顯著性(X2=11.29，P<0.05)。 (6) 實時熒光定量PCR檢測尿液HCMV-DNA(10/40)，與細胞培養(yǎng)法分離病毒(8/40)、ELISA法檢測血漿HCMV-IgM(8/40)，三種方

6、法陽性檢出率比較，差異無顯著性(x2=0.38，P>0.05)。 (7) 在40例臨床患兒血液自細胞計數(shù)中，尿沉渣HCMV-DNA陽性組與陰性組血液自細胞計數(shù)值，差異無顯著性。40例臨床患兒尿液蛋白質(zhì)定性均為陰性。 結(jié)論：實時熒光定量PCR檢測尿液HCMV-DNA，與細胞培養(yǎng)法分離病毒結(jié)果符合度比較，差異無顯著性，該法對診斷HCMV活動性感染有較高的臨床適用價值。該法與ELISA法檢測血漿HCMV-IgM結(jié)果符合度比較，