腸病患者活檢組織中HCMV和HSV感染的檢測及一例潰瘍性結(jié)腸炎患者HCMV活動性感染的確定.pdf

1、目的:采集腸道疾病患者腸活檢組織,采用PCR、Westernblot對人巨細胞病毒(Huamn cyto megalo virus,HCMV)感染進行檢測,并結(jié)合患者臨床資料分析HCMV感染與腸道疾病患者年齡、性別及腸道疾病類別的相關(guān)性;采用PCR對單純皰疹病毒(herpes simplex virus,HSV)進行DNA檢測,分析腸道疾病患者性別、年齡及腸道疾病類別與HSV感染的相關(guān)情況,以進一步了解腸道疾病中HCMV、HSV-1和H

2、SV-2的感染與腸道疾病的相關(guān)性,特別是活動性感染與腸道疾病發(fā)生發(fā)展過程中的關(guān)系以及致病作用提供新線索。并對一例潰瘍性結(jié)腸炎患者HCMV活動性感染進行確定,為進一步研究潰瘍性結(jié)腸炎與活動性HCMV感染的相關(guān)性提供依據(jù),從而有助于潰瘍性結(jié)腸炎的診斷及治療。
　　方法:從安徽省中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院內(nèi)鏡中心采集的32份接受腸鏡檢查后確診為腸道疾病的患者腸組織活檢標本,進行如下處理(1)HCMV感染的病原學(xué)檢測:分別采用細胞培養(yǎng)病毒分離法分離

3、HCMV臨床分離株;PCR檢測HCMVIE-1和UL55基因;Westernblot檢測其中22份活檢標本HCMVIE-1、gB蛋白;記錄分析結(jié)果,確定腸道活檢標本HCMV活動性感染率。(2)HSV-1、HSV-2感染的DNA檢測:采用PCR檢測HSV-1gD基因、HSV-2gG基因,確定腸道疾病患者HSV-1、HSV-2感染率;(3)一例潰瘍性結(jié)腸炎患者標本中HCMV活動性感染的確定:1)腸鏡檢查初步診斷為潰瘍性結(jié)腸炎;2)采用HE染

4、色對患者組織進行病理學(xué)分析;3)采用免疫組織化學(xué)檢測組織中HCMVIE-1、gB蛋白;4)Westernblot檢測組織蛋白中HCMVIE-1、gB蛋白的表達,從而確定HCMV活動性感染。
　　結(jié)果:(1)腸道活檢組織HCMV感染檢測結(jié)果:32份組織采用PCR檢測HCMVHCMVIE-1、UL55基因均為陽性的有20份,陽性率為62.5％(20/32)。對22份組織采用Westernblot檢測HCMVIE-1、gB蛋白,兩者均為

5、陽性的有5份,而活檢組織中蛋白及核酸檢測均為陽性的有5例。因此我們判斷22例標本中HCMV活動性感染的病例共5例,活動性感染率為22.7%(5/22)。(2)腸活檢組織HSV-1、HSV-2DNA檢測結(jié)果:32份組織DNA采用巢氏PCR分別檢測HSV-1gD基因和HSV-2gG基因,HSV-1gD基因陽性的有18份,陽性率為56.25%(18/32)。HSV-2gG基因陽性的有8份,陽性率為25%(8/32)。(3)一例潰瘍性結(jié)腸炎患者

6、HCMV活動性感染的鑒定:腸鏡初步診斷此患者為潰瘍性結(jié)腸炎;HE染色病理結(jié)果證實為腸炎;免疫組化檢測在活檢組織細胞胞核檢測出HCMVIE-1蛋白,在胞漿中檢測出HCMVgB蛋白;Westernblot檢測發(fā)現(xiàn)活檢組織中HCMVIE-1、gB蛋白均為陽性,提示此患者存在HCMV活動性感染。
　　結(jié)論:(1)32例腸道活檢組織中采用PCR檢測HCMVIE-1、UL55基因均為陽性的有20份,陽性率為62.5%(20/32)。其中22份

7、組織HCMVIE-1、UL55基因和IE-1、gB蛋白均為陽性的有5份,活動性感染率為22.7%(5/22)。22份中有10份為IBD患者,10份組織中HCMV活動性感染病例為4份,感染率為40%(4/10),結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),HCMV活動性感染與IBD的發(fā)生有相關(guān)性。(2)32例腸道活檢組織中HSV-1、HSV-2DNA檢測發(fā)現(xiàn),HSV-1gD基因陽性的有18份,陽性率為56.25%(18/32)。HSV-2gG基因陽性的有8份,陽性率為