安胰顆粒對重癥急性胰腺炎大鼠ET、NO及TXA2、PGI2水平的影響.pdf

1、目的：
　　本研究在前期核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）活化及細胞因子表達研究工作的基礎(chǔ)上，進一步檢測重癥急性胰腺炎（Severe Acute Pancreatitis，SAP）大鼠胰腺組織中內(nèi)皮素（endothel in,ET）、一氧化氮（NO）及血栓素A2（thromboxaneA2,TXA2）、前列腺環(huán)素2（prostaglandin2,PGI2）含量水平的變化，闡釋中藥安胰顆粒在治療重癥急

2、性胰腺炎過程中的作用機制，為安胰顆粒在臨床應用上提供必要的基礎(chǔ)實驗數(shù)據(jù)，為中西醫(yī)結(jié)合治療SAP提供可供借鑒的思路和方法。
　　方法：
　　選取雄性清潔級SD大鼠120只，大鼠體重約為200-250g，按隨機數(shù)字表法，分為4個組，分別為：正常對照組、SAP模型組、IL-10陽性對照組及安胰顆粒組，每組30只大鼠。每組按時限，隨機分為3h、6h、12h三個亞組，每個亞組10只大鼠。正常對照組，正常飲食，飲水，給予腹腔內(nèi)注射生理鹽

3、水0.25ml/100g；SAP模型組，造模前禁食12h，正常飲水，給予6％的左旋精氨酸（L-Arginine）溶液（150mg/100g）腹腔內(nèi)注射，頻次為一h一次，共注射三次后，誘導大鼠發(fā)生SAP；IL-10陽性對照組，預先腹腔注射10000U人重組白介素10（rhIL-10），再予L-Arginine腹腔注射（方法同模型組）；安胰顆組，造模前3天，連續(xù)給予安胰顆粒水溶液（8g/Kg）灌胃，頻次為每天一次，連續(xù)三天，再予L-Argi

4、nine腹腔注射（方法同模型組）。以SAP組最后一次腹腔注射6％L-Arginine為計時點，各組的大鼠分別在3h、6h、12h三個時間點，腹腔給于1%戊巴比妥鈉充分麻醉后，分批進行腹主動脈采血，之后將大鼠處死，迅速找到胰腺組織，并摘取。用體積份數(shù)為4％的中性甲醛溶液固定其中一部分胰腺組織，用以病理學評分；其余胰腺組織加入適量生理鹽水后進行搗碎研磨，待胰腺組織研磨充分后，迅速轉(zhuǎn)移至離心機，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘，離心結(jié)束后取上清，凍存于

5、-20℃，用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測大鼠胰腺組織中ET、NO及TXA2、PGI2的含量水平。
　　所有計量資料用均數(shù)±標準差（ x±S）表示，組間兩兩比較采用單因素方差分析數(shù)據(jù)，方差齊則使用方差進行分析，方差不齊則使用秩和檢驗進行分析；相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析。所有結(jié)果使用SPSS17.0forwindows軟件進行進行檢驗，以P＜0.05為顯著性差異標準。
　　結(jié)果：
　?。?）與正常對照組

6、相比較，其余各組組胰腺組織內(nèi)ET含量水平顯著增加（P<0.01），與SAP組比較，IL-10陽性對照組、安胰顆粒組，胰腺組織內(nèi)ET含量水平顯著增加（P<0.01）。與IL-10陽性對照組比較，安胰顆粒組胰腺組織內(nèi)ET含量水平在3h時無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），6h，12h時有明顯差異（P<0.01或P<0.05）。
　?。?）與正常對照組相比較，其余各組組胰腺組織內(nèi)NO含量水平顯著增加（P<0.01），與SAP組比較，IL-10

7、陽性對照組、安胰顆粒組，胰腺組織內(nèi)NO含量水平顯著增加（P<0.01）。與IL-10陽性對照組比較，安胰顆粒組胰腺組織內(nèi)NO含量水平在3h時無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），6h，12h時有明顯差異（P<0.01）。
　?。?）與正常對照組相比較，其余各組組胰腺組織內(nèi)ET/NO比值均數(shù)有明顯差異（P<0.01），與SAP組比較，IL-10陽性對照組、安胰顆粒組，胰腺組織內(nèi)ET/NO比值均數(shù)有明顯差異（P<0.01）。與IL-10陽性對

8、照組比較，安胰顆粒組胰腺組織內(nèi)ET/NO比值均數(shù)有明顯差異（P<0.01）。
　?。?）與正常對照組相比較，其余各組組胰腺組織內(nèi)TXA2含量水平顯著增加（P<0.01），與SAP組比較，IL-10陽性對照組、安胰顆粒組，胰腺組織內(nèi)TXA2含量水平顯著增加（P<0.01）。與IL-10陽性對照組比較，安胰顆粒組胰腺組織內(nèi)TXA2含量水平在3h時無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），6h，12h時有明顯差異（P<0.01或P<0.05）。

9、r>　?。?）與正常對照組相比較，其余各組組胰腺組織內(nèi) PGI2含量水平顯著增加（P<0.01），與SAP組比較，IL-10陽性對照組、安胰顆粒組，胰腺組織內(nèi)PGI2含量水平顯著增加（P<0.01）。與IL-10陽性對照組比較，安胰顆粒組胰腺組織內(nèi)PGI2含量水平在3h時無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），6h，12h時有明顯差異（P<0.05）。
　　(6)與正常對照組相比較，其余各組組胰腺組織內(nèi)TXA2/PGI2比值均數(shù)有明顯差異（

10、P<0.01），與SAP組比較， IL-10陽性對照組、安胰顆粒組，胰腺組織內(nèi)TXA2/PGI2比值均數(shù)有明顯差異（P<0.01）。與IL-10陽性對照組比較，安胰顆粒組胰腺組織內(nèi)TXA2/PGI2比值在3h無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）,在6h有差異性（P＜0.05），在12h時有明顯差異（P<0.01）。
　?。?）SAP組病理學評分顯著高于正常組（ P<0.01）；安胰顆粒組病理學評分較 SAP組明顯下降（P<0.05）。

11、r>　　結(jié)論：
　　1.安胰顆粒能夠明顯改善SAP大鼠胰腺病理損傷程度，保護胰腺組織，在治療SAP以及預防病情加重方面療效確切；
　　2.信號通路NF-κB/iNOS-COX-2在細胞內(nèi)調(diào)控ET、NO以及TXA2、PGI2的活性，是SAP微循環(huán)障礙中血管活性物質(zhì)激活的重要樞紐。
　　3.ET/NO、TXA2/PGI2比值失衡，可能是導致胰腺微循環(huán)障礙的重要機制；
　　4.安胰顆粒可以通過調(diào)控ET/NO以及TXA2