育齡期婦女雌性生殖干細(xì)胞的分離、建系及功能研究.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文育齡期婦女雌性生殖干細(xì)胞的分離、建系及功能研究育齡期婦女雌性生殖干細(xì)胞的分離、建系及功能研究作者姓名：丁新保學(xué)院：BioX研究院專業(yè)：生物學(xué)班級：A1108091學(xué)號：0110809034研究方向：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：吳際教授二零一六年七月上海交通大學(xué)理學(xué)博士學(xué)位論文摘要I育齡期婦女雌性生殖干細(xì)胞的分離、建系及功能研究摘要生殖健康是人類健康的重要組成部分。不孕不育、女性健康障礙以及出生缺陷等疾病與女性生殖細(xì)胞發(fā)育

2、息息相關(guān)。人類雌性生殖干細(xì)胞（FGSCs）的發(fā)現(xiàn)為理解卵子發(fā)生、推遲絕經(jīng)期、治療不育癥以及保存生育力等方面開辟了新的途徑。育齡期婦女卵巢組織主要通過開腹手術(shù)和腹腔鏡手術(shù)獲得，其來源匱乏制約著FGSCs的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用。在輔助生殖中心采集卵母細(xì)胞時需要在超聲引導(dǎo)下進(jìn)行陰道卵巢穿刺抽吸，該操作過程會產(chǎn)生“卵泡抽吸物”（FAs）。全球每年至少有1000000例FAs在收集卵母細(xì)胞后被丟棄，造成了大量臨床資源的浪費(fèi)。前期研究發(fā)現(xiàn)FAs中存在

3、腔前卵泡，暗示卵母細(xì)胞的一個新來源。因此，我們假設(shè)含有FGSCs的少量卵巢組織能夠經(jīng)卵巢穿刺收集到FAs中。本研究的目的是從廢棄的FAs中獲得FGSCs并研究其體內(nèi)外發(fā)育機(jī)制。本研究以手術(shù)切除的少量卵巢組織和IVF中心廢棄的FAs為研究材料。首先，使用免疫熒光組織化學(xué)鑒定卵巢組織中是否存在具有增殖活性的生殖細(xì)胞，并從手術(shù)切除的卵巢組織中分離、培養(yǎng)FGSCs（srFGSCs）。其次，使用細(xì)胞篩網(wǎng)從FAs中獲得少量卵巢組織并從這些組織中獲得