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文檔簡介
1、微紫青霉菌（Penicillium janthinillum）菌株GXCR高抗多種重金屬鹽，在環(huán)境保護和生物浸礦等領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用潛力。本研究構(gòu)建了GXCR的fosmid基因組文庫，并從中篩選抗重金屬相關(guān)同源基因，為進一步研究該菌的抗性機制奠定了基礎(chǔ)。
構(gòu)建的GXCR基因組文庫含有13，348個克隆，重組率100％，隨機插入片段約為40 kb，約覆蓋GXCR單倍體基因組14.83倍。
在NCBI上尋找抗重金屬
2、相關(guān)基因的保守序列，設(shè)計引物，PCR擴增出CRS5、CUP2目的片段。用地高辛標記CRS5、CUP2及P-type ATPase1 kbcDNA片段。通過菌落原位雜交，菌落PCR及Southern雜交驗證，篩選到一株P(guān)-type ATPase基因的陽性克隆，命名為P-025F7。
提取P-025F7質(zhì)粒，雙酶切，Southern雜交，發(fā)現(xiàn)NotⅠ-EcoRⅠ在約10 kb處有一條信號帶；NotⅠ-HindⅢ在1 kb處有一
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