經(jīng)血干細(xì)胞治療肝纖維化及其作用機(jī)制.pdf

1、間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)可能在治療慢性肝病方面擁有巨大的潛能，因而對于再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展起到了積極的作用。經(jīng)血干細(xì)胞(MenSCs)是一種新型來源的MSCs，它來源于女性的月經(jīng)血，擁有非常高的增殖率，同時獲取方便，安全且無毒副作用。相比于骨髓MSCs，MenSCs沒有倫理道德方面的困擾。盡管在一些疾病研究中，MenSCs顯示出了良好的治療效果，但是在肝纖維化治療方面MenSCs的研究至今沒有被報道。
　　在本研究中，我們探索了移植

2、的MenSCs在四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠模型中的治療效果。同時，我們觀察到經(jīng)過兩周的干細(xì)胞移植，MenSCs能夠明顯地改善血清肝功能水平，包括ALT，AST，ALP和TBIL;且經(jīng)病理檢測（天狼星紅染色）得到了進(jìn)一步驗證。此外，我們通過免疫組化，實時熒光定量PCR和western blot（除了TGF-β1之外）檢測了α-SMA和TGF-β1的表達(dá)，實驗結(jié)果表明MenSCs移植兩周后肝星狀細(xì)胞(HSCs)的活性受到了明顯地

3、抑制。通過小鼠活體成像實驗，我們表明MenSCs能夠定向趨化到損傷部位。更進(jìn)一步，體內(nèi)示蹤(GFP)表明MenSCs幾乎沒有分化成功能性肝樣細(xì)胞。這些結(jié)果共同表明MenSCs能顯著改善小鼠肝纖維化。
　　為了進(jìn)一步闡明MenSCs治療肝纖維化的可能機(jī)制，我們采用體外共培養(yǎng)系統(tǒng)來探索MenSCs對LX-2細(xì)胞（HSCs細(xì)胞系）的作用。實驗表明MenSCs能顯著地抑制LX-2細(xì)胞的增殖，同時MenSCs可以影響LX-2細(xì)胞的G0/G1

4、期。除此之外，在共培養(yǎng)體系中（包括LX-2組，transwell組和MenSCs組），我們利用抗體芯片來研究因子的分泌，結(jié)果表明MCP-1，IL-6，HGF，GRO，IL-8和OPG發(fā)揮了非常重要的作用，而這些細(xì)胞因子也很有可能抑制了HSCs的激活和增殖。更進(jìn)一步，我們通過ELISA實驗從定量的角度證明了這些因子的作用效果。
　　綜上所述，我們通過肝纖維化小鼠的體內(nèi)實驗?zāi)Ｐ统醪降卣撟C了MenSCs抗纖維化的能力以及其治療效果。我們