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文檔簡介
1、目的:纖維化(fibrosis)可發(fā)生于多種器官,引起器官內(nèi)纖維結(jié)締組織增生,實質(zhì)細胞減少,持續(xù)進展可導致器官結(jié)構(gòu)破壞和功能減退,直至器官衰竭,嚴重影響人類健康。器官纖維化(organfibrosis)一直是世界醫(yī)學的研究熱點問題之一。糖皮質(zhì)激素是目前治療肝纖維化的常規(guī)用藥物,但它可以引起嚴重的免疫系統(tǒng)紊亂和骨代謝疾病。目前開展的中藥治療纖維化的研究已初步顯示了中藥在防治各種器官(肺臟、肝臟、心臟等)纖維化方面的良好前景。藍玉簪龍膽是一
2、種藏族常用的治療肺部感染的草藥。我們的研究證實其在博萊霉素誘導的動物肺纖維化治療中,具有對抗和治療肺纖維化的作用,并且不具有糖皮質(zhì)激素副作用(國家發(fā)明專利申請?zhí)枺?00510042636.3)。本實驗的目的是用藍玉簪顆粒對二甲基亞硝胺(DMN)誘導的實驗性肝纖維化進行干預,并觀察其對肝纖維化的治療作用,初步探討其作用機理,試圖為臨床肝纖維化的尋找新的藥物。
方法:(1)30只大鼠隨機分為5組,每組6只:正常對照組、二甲基亞硝胺
3、模型組(DMN組);藍玉簪龍膽治療組(LYZ組);強的松治療組(強的松組);藍玉簪龍膽+強的松治療組(LYZ+強組)。參照JENKINS等介紹的制備DMN誘導大鼠肝纖維化模型的方法。同時正常對照組按2ml/kg體重劑量腹腔注射生理鹽水,DMN組、LYZ組、強的松組、LYZ+強組按2ml/kg體重劑量腹腔注射(5mg/L)DMN溶液,每周連續(xù)注射3d,共4wk。其中正常對照組按2ml/kg體重劑量腹腔注射生理鹽水,其余各組按2ml/kg體
4、重劑量腹腔注射(5mg/L)DMN溶液,每周連續(xù)注射3d,共4wk,造模同時按分組給與藥物干預。于建模后28d腹主動脈放血處死各組動物,迅速摘取肝臟,右葉肝制成組織勻漿進行生化檢測,左葉肝投入10%甲醛中固定,常規(guī)包埋,切片,進行HE、MASSON染色,光學顯微鏡下觀察觀察纖維化的程度。肝組織勻漿后進行超氧化物歧化酶(SOD)、單胺氧化酶(MAO)活力、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量檢測。血清用于谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨
5、酶(ALT)及透明質(zhì)酸(HA)的測定。
(2)42只大鼠隨機分為6組:正常對照組6只;二甲基亞硝胺模型組6只(DMN組);強的松治療組6只(強的松組);藍玉簪顆粒高劑量組8只(KL高劑量組);藍玉簪顆粒中劑量組8只(KL中劑量組);藍玉簪顆粒低劑量組8只(KL低劑量組)。建立DMN誘導的肝纖維化動物模型,建模當日對各組動物進行治療:正常對照組:每日按體重0.5ml/100g生理鹽水灌胃;二甲基亞硝胺對照組(DMN組):每日按體
6、重0.5ml/100g生理鹽水灌胃;強的松治療組:將強的松片研成粉末,加蒸餾水配制成0.06%的溶液,參照文獻按6mg/kg進行灌胃;藍玉簪顆粒高劑量組(KL高劑量組):藍玉簪顆粒由第四軍醫(yī)大學第三附屬醫(yī)院藥劑科制作,主要成分為藍玉簪龍膽,輔以三七總苷。每日按4g生藥?kg體重灌胃;藍玉簪顆粒中劑量組(KL中劑量組):每日按2g生藥?kg體重灌胃;藍玉簪顆粒低劑量組(KL低劑量組):每日按1g生藥?kg體重灌胃。于建模后28d腹主動脈放
7、血處死各組動物,迅速摘取肝臟,右葉肝制成組織勻漿進行生化檢測,左葉肝投入10%甲醛中固定,常規(guī)包埋,切片,進行HE、MASSON染色,光學顯微鏡下觀察觀察纖維化的程度。肝組織勻漿后進行超氧化物歧化酶(SOD)、單胺氧化酶(MAO)活力、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量檢測。血清用于谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及透明質(zhì)酸(HA)的測定。
結(jié)果:(1)與正常對照組比較,模型對照組血清ALT與HA均明顯增高,(
8、P<0.05)。藍玉簪治療組(LYZ)較模型對照組ALT與HA明顯下降(P<0.05),強的松治療組與藍玉簪和強的松聯(lián)合用藥治療組與模型對照組相比ALT和HA顯著降低(P<0.05)。DMN組SOD、GSH活力均顯著地低于正常對照組(P<0.05),MAO活力顯著的高于正常對照組,MDA也高于正常對照組,但沒有顯著差別;強的松組SOD、GSH活力顯著低于正常對照組和LYZ組,與DMN組沒有顯著性差異,MAO、MDA活力顯著地低于DMN對
9、照組(P<0.05),其中MDA活力也顯著低于正常對照組。
?。?)與正常對照組比較,模型對照組血清ALT與HA均明顯增高,(P<0.05)。藍玉簪顆粒各治療組較模型對照組ALT與HA明顯下降(P<0.05),強的松治療組與模型對照組相比ALT和HA顯著降低(P<0.05)。DMN組SOD、GSH活力均顯著地低于正常對照組(P<0.05),MAO、MDA活力顯著的高于正常對照組,但沒有顯著差別;藍玉簪顆粒高劑量組SOD、GSH活
10、力顯著地高于DMN組(P<0.05),較正常對照組沒有顯著差別;MAO、MDA活力顯著地低于DMN對照組(P<0.05),與正常對照組沒有顯著性差異;強的松組SOD、GSH活力顯著低于正常對照組和藍玉簪顆粒組,與DMN組沒有顯著性差異,MAO、MDA活力顯著地低于DMN對照組(P<0.05),其中MDA活力也顯著低于正常對照組;藍玉簪顆粒治療組較激素組效果明顯,且有一定的劑量依賴性;HE和MASSON染色觀察到肝纖維化程度改善。
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