EBV相關(guān)胃癌T細(xì)胞腫瘤免疫微環(huán)境的臨床研究.pdf

1、背景與目的：
　　亞洲是胃癌的高發(fā)地區(qū)，且中國(guó)的胃癌發(fā)生率和死亡率分別位居第二和第三位。胃癌的預(yù)后較差，五年生存率不到20％。傳統(tǒng)的胃癌分期（AJCC）雖然可以評(píng)估患者的預(yù)后，但不能很好地指導(dǎo)治療。隨著分子生物及基因測(cè)序技術(shù)的不斷發(fā)展，2014年TCGA(The Cancer Genome Atlas)提出了四種全新的胃腺癌分子分型，包括：Epstein-Barr virus(EBV)陽(yáng)性胃癌、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性胃癌(Microsat

2、ellite unstable, MSI)、染色體不穩(wěn)定性胃癌及染色體穩(wěn)定性胃癌。文獻(xiàn)報(bào)道顯示腫瘤免疫微環(huán)境中淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)水平與預(yù)后密切相關(guān)，尤其在EBV陽(yáng)性胃癌中，淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象明顯且預(yù)后較好。然而，腫瘤免疫微環(huán)境中不同亞群淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)水平，尤其是在EBV陽(yáng)性胃癌的研究較少。此外，隨著免疫抑制分子單抗在腫瘤治療中的應(yīng)用，明星分子PD-1/PD-L1在胃癌中的表達(dá)也隨即得到關(guān)注，部分研究顯示PD-L1表達(dá)的胃癌患者預(yù)后較差。TCGA發(fā)

3、現(xiàn)，EBV陽(yáng)性胃癌中PD-L1/L2過(guò)表達(dá)。本研究的目的是分析EBV陽(yáng)性胃癌的臨床病理學(xué)特征及預(yù)后；評(píng)估胃癌，尤其是EBV陽(yáng)性胃癌中不同亞群淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)水平及其與預(yù)后的關(guān)系；探索PD-1/PD-L1在EBV陽(yáng)性胃癌中的表達(dá)水平及與總體胃癌預(yù)后的關(guān)系。
　　方法：
　　收集2007年1月至2010年1月入西京消化病醫(yī)院須經(jīng)外科手術(shù)切除的原發(fā)胃癌患者并納入研究。排除以下病例：術(shù)前行腫瘤相關(guān)化學(xué)藥物治療；患自身免疫性疾病或長(zhǎng)期服

4、用糖皮質(zhì)激素治療；術(shù)前感染四項(xiàng)提示HIV陽(yáng)性；病理診斷明確的淋巴瘤；其他來(lái)源的胃轉(zhuǎn)移惡性腫瘤。收集相關(guān)的臨床、實(shí)驗(yàn)室、病理學(xué)資料及預(yù)后信息（隨訪(fǎng)終點(diǎn)60個(gè)月）。將組織蠟塊制作成組織芯片進(jìn)行EBV小RNA(EBER)原位雜交篩選EBV陽(yáng)性病例，同時(shí)進(jìn)行CD4,CD8,CD80,Foxp3,PD-1,PD-L1的免疫組織化學(xué)染色。描述EBV陽(yáng)性胃癌與陰性胃癌患者的臨床病理基本特征；Kaplan-Meier法分析兩組患者的生存預(yù)后；組織芯片免

5、疫組織化學(xué)染色評(píng)價(jià)不同亞群T淋巴細(xì)胞及PD-1/PD-L1在腫瘤微環(huán)境中的浸潤(rùn)程度和表達(dá)水平，并分析其與預(yù)后的影響。此外，為進(jìn)一步了解CD8+細(xì)胞浸潤(rùn)與免疫抑制分子表達(dá)的關(guān)系，分析CD+和CD8-浸潤(rùn)胃癌中Foxp3, PD-1和PD-L1的表達(dá)水平。所有數(shù)據(jù)資料均是通過(guò)電子病歷、臨床隨訪(fǎng)和電話(huà)隨訪(fǎng)得到。
　　結(jié)果：
　　該研究一共納入571例原發(fā)胃癌患者進(jìn)行分析，均成功進(jìn)行胃癌手術(shù)切除術(shù)。失訪(fǎng)51例（失訪(fǎng)率8.9%）。EB

6、V陽(yáng)性胃癌共計(jì)32例（占5.3%），與EBV陰性胃癌相比，EBV陽(yáng)性胃癌患者年齡較小（p=0.049），其余臨床病理學(xué)特征與EBV陰性胃癌相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。納入患者的總體中位生存期為25個(gè)月，95%可信區(qū)間為22.2-27.8個(gè)月。EBV陽(yáng)性胃癌生存預(yù)后好于陰性胃癌（p=0.003）。EBV陽(yáng)性胃癌患者1年、2年、3年、4年和5年的總體生存率分別為83.9%、70.9%、64.5%、51.6%和35.5%；EBV陰性胃癌患者1年、2年、

7、3年、4年和5年的總體生存率分別為77.2%、51.3%、31.7%、23.9%和17.0%。免疫組織化學(xué)染色顯示：CD8+ EBV+胃癌患者占64.5%，CD8+EBV-胃癌患者占27.2%（p＜0.001）；Foxp3+EBV+胃癌患者占60.0%，F(xiàn)oxp3+EBV-胃癌患者占38.6%（p=0.020）；CD80+EBV+胃癌患者占37.0%，CD80+EBV-胃癌患者占13.1%（p=0.002）；PD-1+EBV+胃癌患者占

8、48.0%，PD-1+EBV-胃癌患者占32.0%（p=0.096）；PD-L1+EBV+胃癌患者占41.9%，PD-L1+EBV-胃癌患者占40.7%（p=0.912）。CD4及PD-1在EBV陽(yáng)性與陰性胃癌中的表達(dá)率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。分層分析發(fā)現(xiàn)：CD8-PD-1+胃癌患者預(yù)后明顯差于CD8- PD-1-的患者（p=0.034）；CD8+PD-L1-胃癌患者預(yù)后優(yōu)于CD8+PD-L1+患者（p=0.008）。Cox回歸分析表明：腫瘤微環(huán)