固本防哮飲和黃芪甲苷對LPS誘導BEAS-2B細胞分泌IL-2、IL-5、TNF-α水平的影響.pdf

1、目的:本課題主要通過人支氣管上皮細胞(BEAS-2B)培養(yǎng)實驗，觀察固本防哮飲及其有效成分黃芪甲苷對脂多糖(LPS)誘導BEAS-2B細胞中IL-2、IL-5、TNF-α分泌水平的影響。
　　方法:用LPS刺激正常BEAS-2B細胞造模，將造模成功細胞分為固本防哮飲血清高、中、低劑量組和黃芪甲苷高、中、低劑量組，用藥干預24h后收集細胞及其上清液，采用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(real-time PCR)和ELISA測定法測

2、定細胞中IL-2、IL-5、TNF-α分泌水平。
　　結果:(1)固本防哮飲及黃芪甲苷對IL-2的影響:模型組與正常細胞組相比，細胞中IL-2濃度升高，有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。經給藥干預模型組細胞后，觀察各組IL-2濃度，含藥血清高、中、低劑量組和黃芪甲苷高、中、低劑量組中IL-2濃度均明顯下降，與造模組細胞相比有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01);黃芪甲苷高、中、低劑量組兩兩比較IL-2濃度，均不存在統(tǒng)計學差異(P＞0.0

3、5);含藥血清各劑量組之間比較IL-2濃度，存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，且中、高劑量組IL-2表達顯著低于低劑量組(P＜0.01);黃芪甲苷組IL-2濃度明顯低于含藥血清組，有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。(2)固本防哮飲及黃芪甲苷對IL-5的影響:模型組與正常細胞組相比，細胞中IL-5濃度升高，有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。經給藥干預模型組細胞后，觀察各組中IL-5分泌水平，各給藥組IL-5濃度均低于模型組，存在顯著統(tǒng)計學差

4、異(P＜0.01);黃芪甲苷各劑量組之間，中、高劑量組IL-5表達濃度明顯低于低劑量組，有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01);含藥血清不同劑量組之間，含藥血清濃度與IL-5表達濃度成反比，不同劑量組之間兩兩比較均存在顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01);黃芪甲苷組IL-5濃度低于含藥血清組，統(tǒng)計學差異明顯(P＜0.01)。(3)固本防哮飲及黃芪甲苷對TNF-α的影響:模型組與正常細胞組相比，細胞中TNF-α明顯升高，有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。

5、經給藥干預模型組細胞后，觀察各組中TNF-α分泌水平，含藥血清各組及黃芪甲苷各組TNF-α分泌水平與模型組相比明顯下降，有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01);黃芪甲苷組中，中劑量組TNF-α濃度最低，與低、高劑量組之間有明顯統(tǒng)計學差異(P＜0.01);含藥血清各劑量組間TNF-α分泌水平有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，含藥血清濃度越高，TNF-α濃度越低;黃芪甲苷組TNF-α濃度低于含藥血清組，統(tǒng)計學差異明顯(P＜0.01)。(4)固本防

6、哮飲及黃芪甲苷對K-2mRNA水平的影響:模型組與正常細胞組相比，IL-2mRNA明顯升高，有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。經給藥干預模型組細胞后，觀察各組中IL-2mRNA分泌水平，含藥血清組及黃芪甲苷組IL-2mRNA分泌水平明顯低于模型組，有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01);黃芪甲苷不同劑量組之間劑量越大IL-2mRNA表達量越低，存在明顯統(tǒng)計學差異(P＜0.01);含藥血清低劑量組IL-2mRNA分泌濃度最高，與另兩組之間存在明

7、顯統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，中高劑量組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);含藥血清組IL-2mRN表達量均高于黃芪甲苷組，存在明顯統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。
　　結論:1.固本防哮飲含藥血清及其有效成份黃芪甲苷可有效抑制BEAS-2B細胞中炎癥因子IL-2、IL-5、TNF-α的分泌。
　　2.固本防哮飲含藥血清及其有效成份黃芪甲苷可控制BEAS-2B細胞中IL-2mRNA的表達水平。
　　3.固本防哮飲作用機制可能