登革病毒NS1抗原檢測在登革熱早期診斷的意義.pdf

1、研究背景：
　　登革熱是一種蚊媒病毒型傳染病，病原體是登革病毒（DENV)，該病毒分為四種血清型（DENV1-4），主要的傳播媒體是埃及伊蚊。近幾十年來登革熱已由一種散發(fā)性疾病發(fā)展為一個重要公共衛(wèi)生問題，隨著登革熱流行地區(qū)的擴大，發(fā)病和重癥人數(shù)的不斷增多，并由此帶來重大的經(jīng)濟和社會問題。登革熱在100多個國家和地區(qū)流行，主要流行地區(qū)為東南亞、南美洲、西太平洋地區(qū)、非洲和東地中海地區(qū)，在過去的50年間登革熱發(fā)病率增加了約30倍。20

2、14年6月以來，廣東省爆發(fā)20年來最大的登革熱疫情，廣東全省共有20個地市累計報告登革熱病例4萬余例，主要以1型DENV為主，重癥病例多且出現(xiàn)死亡病例。
　　能早期診斷登革熱對患者的治療和疾病的防控非常重要。病毒分離是診斷的金標準，但耗時較長。病毒核酸檢測技術，在發(fā)病早期的1天內就可進行登革病毒的鑒定和分型診斷，是目前較好的登革熱早期診斷方法，其敏感性高于病毒分離，可用于早期快速診斷及血清型鑒定，但對實驗室條件有較高的要求。血清學

3、檢測主要檢測登革病毒特異性IgM和IgG抗體，由于登革病毒與黃病毒科其它成員之間存在共同抗原簇，因而容易出現(xiàn)交叉反應，而且要等到發(fā)病的第4-5天才可以檢出IgM抗體，故其不能很好地滿足臨床早期診斷的需要。NS1抗原檢測在國外主要用于科研，在國內尚未用于臨床診斷。
　　研究目的及意義：
　　本研究通過對NS1抗原、病毒核酸和IgM抗體檢測3種臨床常用的登革熱病毒感染檢測方法進行比較，探討登革病毒NS1抗原檢測用于臨床早期診斷的

4、價值。
　　研究方法：
　　1.收集236例住院登革熱患者系列血清或血漿樣品746份，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測登革病毒NS1抗原，采用Panbio登革熱IgM/IgG捕獲ELISA法檢測血清或血漿中特異性抗體，RT-PCR檢測病毒載量。對3種檢測方法陽性率進行比較，探討NS1抗原檢測在登革熱早期診斷的意義。
　　2.收集121份登革熱患者發(fā)病第2至12天的血清標本，對每份血清標本均進行登革熱病毒NS1抗原、登革病毒核酸和

5、登革病毒特異性IgM抗體檢測檢測。探討NS1抗原檢測檢測與其他檢測方法聯(lián)合應用是否能夠提高登革熱診斷敏感性。
　　3.收集38例住院登革熱患者系列血清或血漿樣品298份，至少包含發(fā)熱期和極期中的3個時點。采用Panbio登革熱IgM/IgG捕獲ELISA法檢測血清或血漿中特異性的抗體。每個樣品做3個復孔，取平均值后使用試劑盒公式算出PanbioUnits值。依據(jù)抗體的動態(tài)變化進行初次/二次感染判定，并與常用的依據(jù)IgM/IgG比值

6、判定方法比較。
　　研究結果：
　　1.從第2天開始各時間的的NS1抗原陽性率均高于病毒核酸檢測陽性率，其中第7天至第11天差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。第1天至第10天NS1抗原陽性率高于IgM抗體陽性率，第1天至第5天和第7天差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　2.NS1抗原檢測、病毒核酸檢測和特異性IgM抗體檢測的陽性率分別為83.5％、88.4%和100%。NS1抗原聯(lián)合病毒核酸檢測的陽性率為96.

7、7%，NS1抗原聯(lián)合IgM抗體檢測的陽性率為100%，病毒核酸聯(lián)合IgM抗體檢測的陽性率為99.2%。
　　3.觀察到5種不同的登革病毒特異IgM和IgG抗體反應趨勢。依據(jù)IgG反應趨勢可區(qū)分成2組。一組IgG在病程的第4-5天可檢測到，呈現(xiàn)快速上升。另一組在病程的第7天可檢測到，一直維持在低的水平。依據(jù)IgM和IgG抗體反應趨勢判定輕癥樣品中初次感染11例（29.7%）；輕癥樣品中二次感染9例（24.4%）；重癥樣品中初次感染7