TUBB3、STMN1與BRCA1的表達(dá)水平與胃癌治療藥物的關(guān)聯(lián)性及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討3型β微管蛋白（Tubulin beta3，TUBB3）、微管不穩(wěn)定性蛋白（Stathmin1，STMN1）、腺癌癌易感基因(Breast cancer1，BRCA1)在胃癌和癌旁組織中的表達(dá)，分析其與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性；探討參芪扶正注射液(shenqifuzheng injection，SFI)和多西他賽（docetaxel，TXT）對(duì)胃癌BGC-823細(xì)胞系的影響及作用機(jī)制。
　　方法：
　　(1)免疫組織化

2、學(xué) Elivision法檢測(cè)54例胃癌組織和20例的相應(yīng)癌旁組織中TUBB3、STMN1與BRCA1蛋白表達(dá)，分析其相關(guān)性。
　　(2)CCK8法檢測(cè)不同濃度SFI（5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、40mg/ml、80mg/ml）、不同濃度TXT（3.75mg/L、7.5mg/L、15mg/L、30mg/L、60mg/L）及7.5 mg/L TXT聯(lián)合不同濃度SFI（5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、40

3、mg/ml、80mg/ml）作用不同時(shí)間（24h、48h及72h）對(duì)BGC-823細(xì)胞增殖的影響。
　　(3)不同濃度SFI（5mg/ml、20mg/ml、80mg/ml）、不同濃度TXT（3.75mg/L、15mg/L、60mg/L）及7.5mg/L TXT聯(lián)合不同濃度SFI（5mg/ml、20mg/ml、80mg/ml）作用于BGC-823細(xì)胞48h后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的變化。
　　(4)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-

4、PCR)法檢測(cè)胃癌細(xì)胞對(duì)照組和加藥組中TUBB3mRNA、STMN1mRNA、BRCA1mRNA基因的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　(1)54例胃癌組織和20例相應(yīng)癌旁組織中BRCA1、STMN1和TUBB3蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率胃癌組織高于癌旁組織；胃癌中STMN1蛋白與胃癌患者病理的分化程度有關(guān)，而B(niǎo)RCA1與TUBB3蛋白與胃癌患者的臨床病理特征無(wú)相關(guān)性；其中只有STMN1和TUBB3蛋白在胃癌組織中的表達(dá)有一定的相關(guān)性（r=0.

5、276，P<0.05）。
　　(2)多西他賽或參芪扶正注射液都能抑制BCG-823細(xì)胞的增殖，隨著藥物濃度的升高，作用時(shí)間的延長(zhǎng)，BGC-823細(xì)胞增殖抑制率逐漸增大，與陰性對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)；與對(duì)照組相比，隨著藥物作用時(shí)間（24h,48h和72h）的延長(zhǎng)，多西他賽（7.5mg/L）與不同濃度參芪扶正注射液聯(lián)合作用，細(xì)胞的增殖抑制率逐漸增大(P均<0.01)，但與藥物濃度沒(méi)有明顯的關(guān)系(P>0.05)。

6、>　　(3)不同濃度的多西他賽或參芪扶正注射液抑制細(xì)胞增殖阻滯細(xì)胞于G2/M或S期，與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05）；不同濃度參芪扶正注射液與多西他賽（7.5mg/L）聯(lián)合后抑制細(xì)胞增殖細(xì)胞阻滯于G2/M期，與對(duì)照組比較也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05）。
　　(4)與對(duì)照組相比，加藥組TUBB3與STMN1mRNA的表達(dá)量均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05）；而B(niǎo)RCA1mRNA表達(dá)量加藥組與對(duì)照組無(wú)明顯