運(yùn)動(dòng)經(jīng)PI3K-Akt和MAPK通路間平衡介導(dǎo)調(diào)控高血壓VSMC的表型轉(zhuǎn)換.pdf

1、研究目的：血管平滑肌的表型轉(zhuǎn)換是其增殖和遷移的關(guān)鍵性起始步驟，同時(shí)血管平滑肌的增殖和遷移是高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后再狹窄等心血管疾病的共同發(fā)病基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)旨在探究增齡和有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)SHR胸主動(dòng)脈平滑肌表型轉(zhuǎn)換及PI3K和MAPK信號(hào)通路間平衡的調(diào)控。
　　研究方法：第一部分：選取1、3、9、16月齡的雄性WKY和SHR各12只，尾動(dòng)脈無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)定后麻醉，取各組大鼠的胸主動(dòng)脈進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1.H&E染色：測(cè)量胸主動(dòng)脈的管壁厚度；

2、2.免疫組化實(shí)驗(yàn)：檢測(cè)平滑肌表型標(biāo)志蛋白α-SM-actin、calponin、OPN的表達(dá)和分布；3.Western Blot蛋白印跡法：檢測(cè)平滑肌表型標(biāo)志蛋白α-SM-actin、calponin、OPN的表達(dá)量，信號(hào)蛋白p-Akt、Akt、eNOS、p-42/44ERK、42/44ERK、p-p38MAPK、p38MAPK的表達(dá)量。
　　第二部分：選取3月齡雄性WKY和SHR各24只，分組如下：正常血壓安靜對(duì)照組（WKY-S

3、ED，n=12）、正常血壓有氧運(yùn)動(dòng)組（WKY-EX，n=12）、高血壓安靜對(duì)照組（SHR-SED，n=12）、高血壓有氧運(yùn)動(dòng)組（SHR-EX，n=12）。運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行8周跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)干預(yù)，運(yùn)動(dòng)前后尾動(dòng)脈無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)定，取胸主動(dòng)脈進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)同第一部分。
　　研究結(jié)果：第一部分：（1）血壓：WKY和SHR的SBP均隨年齡增長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，與同年齡的WKY組相比，SHR組的SBP顯著升高（P<0.01）。（2）H&E染色：胸主動(dòng)脈的管

4、壁厚度隨年齡增長(zhǎng)不斷增加，且在9月齡時(shí)WKY和SHR出現(xiàn)顯著差異（P<0.01）。（3）免疫組化和Western Blot實(shí)驗(yàn)：3月齡后，WKY SHR的α-SM-actin、calponin蛋白表達(dá)量均隨年齡增加出現(xiàn)下調(diào)，而OPN出現(xiàn)上調(diào)，且3月齡時(shí)WKY和SHR已具有顯著差異（actin、calponin：P<0.05，OPN：P<0.01）。p-Akt、eNOS的蛋白表達(dá)量隨年齡增加逐漸下調(diào)，p-ERK、p-p38蛋白表達(dá)量隨年齡

5、增長(zhǎng)逐漸上調(diào)。
　　第二部分：（1）血壓：與WKY-SED組相比，SHR-EX組SBP顯著升高（P<0.01），WKY-EX組SBP顯著性下降（P<0.05）。與SHR-SED組相比，SHR-EX組SBP出現(xiàn)顯著下調(diào)（P<0.01）。（2）H&E染色：與WKY-SED組相比，SHR-SED組胸主動(dòng)脈管壁厚度明顯增加（P<0.01），WKY-EX組無(wú)顯著性差異；與SHR-SED組相比，SHR-EX組胸主動(dòng)脈管壁厚度顯著降低（P<0.

6、05）。（3）免疫組化和Western Blot實(shí)驗(yàn)：與WKY-SED組相比，SHR-SED組α-SM-actin、calponin蛋白表達(dá)水平顯著性下調(diào)，而OPN顯著性上調(diào)（P<0.01），WKY-EX組無(wú)顯著性差異。與SHR-SED組相比，SHR-EX組α-SM-actin、calponin蛋白表達(dá)水平顯著性上調(diào)，OPN顯著性下調(diào)（P<0.05）。與WKY-SED組相比，SHR-SED組p-Akt、eNOS的表達(dá)量顯著性下調(diào)（P<0

7、.01），p-ERK、p-p38的表達(dá)量顯著性上調(diào)（P<0.01），WKY-EX組p-Akt（P<0.05）、eNOS（P<0.01）的表達(dá)量呈上調(diào)趨勢(shì)。與SHR-SED組相比，SHR-EX組p-Akt（P<0.05）、eNOS（P<0.01）的表達(dá)量顯著性上調(diào)，p-ERK（P<0.05）、p-p38（P<0.05）表達(dá)量顯著性下調(diào)。
　　研究結(jié)論：隨年齡增長(zhǎng)，正常血壓大鼠和高血壓大鼠胸主動(dòng)脈的血管平滑肌中的收縮表型標(biāo)志蛋白逐漸減