FHIT、P16蛋白在肝細胞肝癌組織中的表達、相關性及其臨床意義.pdf

1、背景：
　　原發(fā)性肝細胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)在新的癌癥診斷中占據(jù)第六位,也是全球癌癥死亡的第三個最常見的原因。對于肝癌目前的治療效果還遠遠不能令人滿意，其五年存活率大約只有10％。肝移植在目前被認為是其唯一的治愈性療法，然而肝癌晚期和不能切除的肝細胞癌患者占了80％以上，而這些患者又是不適合進行肝臟移植或手術切除的。常見的一些化療方案，如使用常規(guī)的具有細胞毒性的藥物，例如阿霉素，順鉑和

2、氟尿嘧啶的化療，這也是一種治療手段，特別是針對晚期腫瘤患者的臨床治療。然而因為嚴重的毒性反應和高復發(fā)率，這些治療的存活時間也僅僅只能維持在大約六個月左右。因此，研究探索 HCC新的檢測或者治療手段就顯得尤為必要和迫切。
　　對于腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的生物活動一直是諸多學者研究的熱點，腫瘤抑制基因和癌基因的活動也已經(jīng)證實在腫瘤發(fā)生中的啟動作用，還有不少分子集團、分子通路以及轉錄蛋白也起到十分重要的作用。脆性組氨酸三聯(lián)體(fragile

3、 histidine triad, FHIT)是1996年Ohta[1]等研究人員提出的一個新抑癌基因，該基因存在于絕大多數(shù)的正常器官組織中，跨越位點FRA3B，位于染色體的3q14.2區(qū)域，其高度同源于組氨酸三聯(lián)體蛋白，因此被定義為FHIT，其通過誘導細胞凋亡，阻滯細胞的生長周期來發(fā)揮抑制腫瘤增殖的作用。但在人類的多種惡性腫瘤中(膀胱癌、胃癌、肺癌、食管癌、結腸癌等）呈現(xiàn)出雜合缺失，轉錄差錯，從而引起FHIT蛋白的表達降低甚至缺失，最

4、終導致其抑癌作用降低甚至喪失。另外近年來新發(fā)現(xiàn)的一種多腫瘤抑制的基因(multiple tumor suppressor，MTS1)，即為P16基因，由P16基因所表達的大約16KD的蛋白質分子被命名為P16蛋白，CDK(cyclin-dependentkinase，CDK)的活性功能是細胞進入生長周期的前提條件，而細胞周期蛋白(cyclin)一定要和CDK發(fā)生結合，而結合所形成的cyclin復合體才可以活化，Rb基因的表達產(chǎn)物P110

5、Rb蛋白磷酸化依賴于cyclin復合體，活化后的Rb蛋白能夠使得細胞進入G1-S期的生長周期，而在此過程中P16蛋白作為始動因素，其作用是抑制CDK的生物活性[2-4]。一旦P16基因因缺失、甲基化或者發(fā)生基因突變而不能表達P16蛋白時，細胞內競爭性結合CDK4的能力就會下降，對于細胞有絲分裂活動就不能進行有效地阻斷，這樣會導致CDK4和細胞周期蛋白的結合增多，從而使得有絲分裂活動在細胞內變得活躍，最終演變?yōu)榧毎纳L活動失去控制。有報

6、道提出惡性腫瘤的組織學分級可能與P16基因的表達不存在明顯的因果關系，而與腫瘤的淋巴結轉移和TNM分期有關，由此可能提示P16蛋白可能是預測肝癌患者預后的一項重要指標[5]。因此FHIT、P16蛋白作為肝癌發(fā)生過程中的一個靶點，對其診斷，治療及預后都有重要價值。本實驗采用免疫組化技術對74例肝癌標本進行檢測，目的在于了解FHIT和P16蛋白在肝癌組織中的表達情況，結合臨床檢查指標，探討這兩個指標在肝癌發(fā)生中的作用及其相關性，闡述FHIT

7、、P16在HCC臨床診斷和發(fā)生發(fā)展過程中的價值。
　　目的：
　　研究FHIT和P16兩種因子在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的意義及二者間所存在的相關性，為肝癌臨床藥物治療提供新的理論基礎，也為患者早期個體化治療、靶向治療提供新的思路和方法。
　　方法：
　　收集鄭州大學第一附屬醫(yī)院2009年5月至2011年7月的74例進行手術治療的肝癌患者病理標本、臨床資料。其中女性患者23例，年齡29-77歲，平均年齡50.43±3.

8、24歲；男性患者51例，年齡26-73歲，平均年齡47.18±2.36歲。對于我們所收集病例的選擇條件為：1.均未在手術前進行其他任何形式的放、化療治療；2.對于所有肝癌患者的病理學診斷結果均有兩位病理科副高級職稱醫(yī)務人員共同證實；3臨床資料較為完備。我們采用 SP（ streptavidin peroxdase conjugated method）法檢測遠癌組織、癌旁組織和肝癌組織中FHIT和P16蛋白的表達，采用Biosens Di

9、gital Imaging System v1.6分析圖像系統(tǒng)定量分析所得結果，用平均灰度值（average density）表示免疫組化結果的染色強度。統(tǒng)計分析FHIT、P16蛋白與所收集臨床指標及此二者表達的相關性和意義。
　　結果：
　　1.FHIT在組織中的表達：三組組織中FHIT的表達依次降低，遠癌組呈強陽性，癌旁組織和癌組織的表達均有缺失存在，且遠癌肝組織組>癌旁組>肝癌組，兩兩比較后，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0

10、.01)。
　　2.P16在組織中的表達：P16在三組組織中表達依次降低，遠癌組呈強陽性，癌旁組織和癌組織的表達均有缺失存在，且遠癌肝組織組>癌旁組>肝癌組，兩兩比較后，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　3.FHIT和P16在三組組織中的相關性表達分別為：（1）癌組織中rs=0.572、P=0.004；（2）癌旁組織中rs=0.495、P=0.007；（3）遠癌組織中 rs=0.309、P=0.017。三組的相關性分

11、析中 P值均<0.05，rs也均為正數(shù)，因此在三組中 FHIT和 P16的表達均存在相關性,且呈低到中度正相關。
　　4. FHIT的表達與年齡、性別和肝癌大小無關，與肝癌的TNM分期、分化程度、淋巴結轉移情況及門靜脈癌栓是否形成有關；P16的表達與性別、年齡、TNM
　　分期、淋巴結轉移情況、和門靜脈癌栓是否形成無關，與肝癌的大小、分化程度有關。
　　結論：
　　1.FHIT與P16基因作為新的抑癌基因在肝癌的