NPRL2、survivin在肝細胞肝癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、目的：肝細胞肝癌(Hepatocellulur carcinoma，HCC)是我國常見的惡性腫瘤之一，目前隨著醫(yī)療技術(shù)的迅猛發(fā)展，HCC的臨床早期診斷、治療、預(yù)后等較前有了明顯提高和改善，但是其病死率仍然居高不下?；蛲蛔冊贖CC的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要意義，其可導(dǎo)致多種原癌基因的激活、抑癌基因的失活。NPRL2（nitrogen permease regulator-like2）是在肺癌中發(fā)現(xiàn)的一種候選腫瘤抑制基因，表達于肝臟、肺、腎

2、臟等多種正常組織中，但是在結(jié)直腸癌、肺癌等惡性腫瘤中表達下調(diào)。然而，目前有關(guān)NPRL2在HCC中的研究報道較少。Survivin屬于凋亡抑制蛋白家族成員，具有調(diào)節(jié)細胞分裂、抑制細胞凋亡、參與腫瘤的血管形成等多種功能。據(jù)文獻報道，幾乎所有惡性腫瘤（如肺癌、乳腺癌等）中均存在survivin基因的表達異常。PI3K/PDK1/AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在細胞穩(wěn)態(tài)的維持、細胞增殖的調(diào)控等方面有重要作用，其調(diào)控異常可參與腫瘤的形成。有研究表明，NPRL

3、2、survivin基因均參與PI3K/PDK1/AKT信號通路的調(diào)控，但是生物學(xué)效應(yīng)相反[7]。然而，至今尚無文獻報道NPRL2和survivin兩者之間是否存在相關(guān)性。本實驗采用RT-PCR法、免疫組織化學(xué)方法，分別從RNA、蛋白質(zhì)水平上探討NPRL2、survivin在HCC組織中的表達情況及其與各臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系，并分析兩者之間的聯(lián)系，從而指導(dǎo)其在肝細胞肝癌中的臨床應(yīng)用。
　　方法：在2013年5月至2014年6月

4、期間，我們收集了山東省立醫(yī)院行肝癌切除術(shù)的肝細胞肝癌組織標(biāo)本及其對應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本共計45例，以及行肝臟血管瘤切除術(shù)的正常肝臟組織標(biāo)本15例。部分組織標(biāo)本提取RNA，采用RT-PCR方法檢測HCC組織、癌旁組織以及正常肝臟組織中NPRL2、survivin的表達情況。取部分組織標(biāo)本做成組織蠟塊并切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法觀察各組織中NPRL2、survivin的表達水平。同時收集所有HCC患者的臨床病理資料，探究NPRL2、survivi

5、n與各臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：⑴RT-PCR結(jié)果分析顯示，HCC組織中NPRL2 mRNA的表達量低于其相應(yīng)的癌旁組織和正常肝臟組織(P＜0.01)，各組織的相對表達量分別為0.36±0.06、0.52±0.07、0.55±0.07。免疫組織化學(xué)結(jié)果表明，NPRL2蛋白在正常肝臟組織和癌旁組織中的表達量均高于HCC組織(P＜0.01)，其陽性表達率分別為86.67％(13/15)、93.33％(42/45)、33.3

6、3％(15/45)。NPRL2 mRNA、蛋白質(zhì)在正常肝臟組織及其癌旁組織中的表達情況比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。⑵Survivin mRNA在HCC組織(1.47±0.08)中的表達量明顯高于其相應(yīng)的癌旁組織（0.78±0.05）、正常肝臟組織（0.76±0.06）(P＜0.01)。免疫組化染色結(jié)果顯示，survivin蛋白在HCC組織中的表達明顯高于癌旁組織和正常肝臟組織(P＜0.01)，各組織的陽性率分別為64.44

7、％(29/45)、8.89％(4/45)、20％(3/15)。然而，survivin mRNA和蛋白質(zhì)在正常肝臟組織和癌旁組織中的表達無明顯差異(P＞0.05)。⑶通過免疫組織化學(xué)結(jié)果分析，結(jié)合HCC患者的臨床病理資料，NPRL2、survivin在HCC組織的表達情況均與患者的年齡、性別、腫瘤大小、有無門靜脈癌栓的形成及HBsAg、HBeAg、 HBV-DNA是否陽性等無相關(guān)性(P＞0.05)，但是與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤的TNM分期有關(guān)(

8、P＜0.05)。另外，survivin的表達還與血清AFP濃度有關(guān)(P＜0.05)。⑷Spearman等級相關(guān)分析結(jié)果顯示，在肝細胞肝癌組織中，NPRL2、survivinmRNA的表達呈負相關(guān)(r=-0.45，P＜0.01)。
　　結(jié)論：在肝細胞肝癌中，NPRL2是一種新近發(fā)現(xiàn)的腫瘤抑制基因，而survivin是一種凋亡抑制基因，并且NPRL2、survivin的表達存在負相關(guān)的關(guān)系，兩者共同參與了HCC的發(fā)生和發(fā)展，這為腫瘤的