鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)對MIN6β細(xì)胞的毒性作用及維生素C、E干預(yù)效果研究.pdf

1、目的：鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯（DEHP）作為公認(rèn)的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物應(yīng)用廣泛,易釋放至環(huán)境中，使人群普遍暴露。流行病學(xué)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究均表明DEHP暴露與糖代謝紊亂密切相關(guān)，但DEHP對胰腺β細(xì)胞毒性作用研究報(bào)道甚少。為評(píng)價(jià)DEHP對胰腺β細(xì)胞的損害及其可能機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)選用MIN6β細(xì)胞作為研究對象，觀察DEHP對MIN6β細(xì)胞生長活力、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響；同時(shí)研究抗氧化性維生素C、E干預(yù)后效果，對其可能的機(jī)制進(jìn)行探究，為臨床預(yù)

2、防及治療此類損傷所致的糖代謝紊亂提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：選用小鼠胰腺M(fèi)IN6β細(xì)胞株為實(shí)驗(yàn)對象，染毒組用不同濃度的DEHP(0.25-2mmol/L)處理；干預(yù)組同時(shí)將 DEHP(0.25-2mmol/L)、維生素C(50μmol/L)、維生素E(50μmol/L)與MIN6β細(xì)胞共培養(yǎng)。作用時(shí)間為16、48和72小時(shí)。通過MTT實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞活力，Annexin-V-FITC-PI染色流式細(xì)胞技術(shù)測定細(xì)胞凋亡率，PI單染色測定細(xì)

3、胞周期。
　　結(jié)果：⑴與溶劑對照組比(1)隨著DEHP濃度劑量和時(shí)間的增加，MIN6β細(xì)胞生長活力受到抑制，細(xì)胞生存率明顯下降（P＜0.01）；⑵不同濃度的DEHP亦可誘導(dǎo)MIN6β發(fā)生明顯的細(xì)胞凋亡（P＜0.01）；⑶DEHP亦能明顯干擾MIN6β細(xì)胞周期進(jìn)程，使MIN6β細(xì)胞多停滯在G0/G1期，G2/M期與S期細(xì)胞比例降低(P<0.01)。⑷與單獨(dú)DEHP染毒組相比，維生素C、E對DEHP誘導(dǎo)的MIN6β細(xì)胞生長活力下降、細(xì)