空氣顆粒性污染物對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成的影響及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：
　　近年來，我國(guó)各大城市的空氣污染問題越來越受到人們的關(guān)注，關(guān)于空氣顆粒性污染與人體健康的研究逐年增多，但研究大多集中與對(duì)呼吸系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)疾病的影響，對(duì)于皮膚疾病的影響研究較少。在皮膚領(lǐng)域有限的研究中，大部分研究關(guān)注于空氣顆粒性污染物對(duì)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞及真皮成纖維細(xì)胞的影響，而對(duì)黑素細(xì)胞影響的研究寥寥無幾。空氣顆粒性污染物的組成復(fù)雜，其中有機(jī)化合物成分占顆粒物總質(zhì)量的10％-30％，以多環(huán)芳烴類(PAHs)化合物為主[

2、1,2]，而臨床上亦有PAHs引起皮膚病理性色素沉著的報(bào)道[3]。本課題利用一種主要成分為多環(huán)有機(jī)化合物的空氣顆粒性污染物標(biāo)準(zhǔn)品SRM1649b的浸出液刺激正常人表皮黑素細(xì)胞(NHM)，旨在探究空氣顆粒性污染物是否會(huì)對(duì)正常人表皮黑素細(xì)胞黑素合成量及黑素合成相關(guān)基因的表達(dá)產(chǎn)生影響，從而引起皮膚顏色的改變。
　　方法：
　　從正常人皮膚組織分離純化表皮黑素細(xì)胞，制備空氣顆粒性污染物標(biāo)準(zhǔn)品SRM1649b浸出液，用不同濃度的SRM

3、1649b浸出液培養(yǎng)NHM，48小時(shí)后CCK-8法檢測(cè)不同濃度的SRM1649b浸出液對(duì)NHM生存率的影響并選擇適宜的實(shí)驗(yàn)濃度。采用NaOH裂解法檢測(cè)各濃度實(shí)驗(yàn)組黑素細(xì)胞內(nèi)黑素相對(duì)含量;采用細(xì)胞免疫熒光法觀察SRM1649b浸出液刺激前后黑素細(xì)胞內(nèi)芳香族化合物受體AHR的分布變化;用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)各濃度實(shí)驗(yàn)組黑素細(xì)胞中芳香族化合物受體(AHR)及與黑素化過程相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)、黑素合成關(guān)鍵酶酪氨酸

4、酶(TYR) mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　正常人表皮黑素細(xì)胞表達(dá)AHR;在一定濃度范圍內(nèi)，給予SRM1649b浸出液刺激正常人表皮黑素細(xì)胞可以引起細(xì)胞內(nèi)AHR由細(xì)胞漿向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移;各濃度實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，AHR mRNA表達(dá)上調(diào)并與SRM1649b浸出液濃度呈正相關(guān);與黑素合成相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子MITF及關(guān)鍵酶TYR mRNA表達(dá)以及細(xì)胞內(nèi)黑素相對(duì)含量均有增加但與濃度無明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　　在一