對化濕行瘀清熱方劑治療口腔扁平苔蘚前后血清中差異蛋白的研究.pdf

1、目的：對口腔扁平苔蘚(oral lichen planus,OLP)患者使用化濕行瘀清熱方劑前、后血清中的差異蛋白進行研究，探討化濕行瘀清熱方劑對口腔扁平苔蘚的治療效果及相關作用機制。
　　方法：
　　1.抽取OLP患者初診和經(jīng)化濕行瘀清熱方劑治療8周后的靜脈血，靜置30min后離心，吸取上層血清，苯酚抽提法提取總蛋白，Bradford法測定蛋白濃度，采用雙向熒光差異凝膠電泳技術(two-dimensional fluore

2、scence difference gel electrophoresis,2-D DIGE)篩選治療前、后的差異蛋白。
　　2.液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(liquid chromatography-mass spectrometry， LC-MS)鑒定由2-D DIGE篩選出的OLP患者治療前、后血清中的差異蛋白點。
　　3.蛋白免疫印跡法(Western blot)驗證 OLP患者治療前后血清中差異蛋白的表達情況。

3、　　4.酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)對 OLP患者治療前后血清中差異蛋白的表達情況進行定量研究。
　　結果：1.口腔扁平苔蘚患者經(jīng)過化濕行瘀清熱方劑治療前、后的血清中存在差異蛋白點，質(zhì)譜技術對差異蛋白點進行驗證，篩選出的差異蛋白有結合珠蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、補體成分C1、維生素D結合蛋白；2.Western blot結果顯示結合珠蛋白的表達量在口腔扁平苔蘚患者治療后的血清中較治療前高,人抗凝血酶Ⅲ在治療后的血清中表達量較治療前低(

4、P＜0.05)；3.ELISA結果顯示結合珠蛋白在口腔扁平苔蘚患者治療后的血清中濃度較治療前升高(P＜0.05)。
　　結論：
　　1.化濕行瘀清熱方劑治療口腔扁平苔蘚患者前、后的血清中存在的差異蛋白包括結合珠蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、補體成分C1和維生素D結合蛋白。
　　2.結合珠蛋白在口腔扁平苔蘚患者治療后血清中的表達升高，人抗凝血酶Ⅲ的表達降低，這兩種蛋白表達量的差異與化濕行瘀清熱方劑對口腔扁平苔蘚的作用機制有一定關系