辛二酰苯胺異羥肟酸單獨(dú)及聯(lián)合紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株OC3的殺傷與自噬.pdf

1、卵巢癌是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤。手術(shù)及化療現(xiàn)仍是治療卵巢癌的主要方法。紫杉醇(Paclitaxel，PTX)是目前治療卵巢癌化療的首選基礎(chǔ)用藥，研究發(fā)現(xiàn)該藥除可抑制腫瘤外，還可引起腫瘤細(xì)胞自噬的發(fā)生。目前治療上皮性卵巢癌仍是采用紫杉醇聯(lián)合鉑類藥物，但鉑類藥物的耐藥始終影響著卵巢癌的治療效果，故以紫杉醇為核心的聯(lián)合治療方案現(xiàn)已成為治療卵巢癌領(lǐng)域的新熱點(diǎn)。
　　辛二酰苯胺異羥肟酸（suberoylanilide hydroxamic ac

2、id，SAHA）屬組蛋白去乙?；敢种苿?HDAC inhibitor，HDACI)中異羥肟酸類，是現(xiàn)今HDACI中最具代表性藥物。研究表明SAHA可介導(dǎo)組蛋白去乙?；?histone deacetylase，HDAC)異常表達(dá)的基因，起到抗腫瘤作用。SAHA除對(duì)許多實(shí)體瘤及血液系統(tǒng)腫瘤具有高效殺傷作用外還可與多種化療藥物聯(lián)用發(fā)揮協(xié)同效應(yīng)，并具有誘導(dǎo)細(xì)胞分化，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，引發(fā)細(xì)胞自噬等作用。現(xiàn)已獲批應(yīng)用于臨床治療。新近研究表明，腫瘤

3、的發(fā)生發(fā)展與自噬密切相關(guān)。本研究擬通過(guò)觀察SAHA單獨(dú)及聯(lián)合PTX對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株OC3殺傷效應(yīng)及自噬的影響，為卵巢癌治療提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　本實(shí)驗(yàn)通過(guò)培養(yǎng)人卵巢癌細(xì)胞株OC3，經(jīng)MTT法檢測(cè)SAHA、單獨(dú)及聯(lián)合PTX應(yīng)用是否對(duì)OC3細(xì)胞具有抑制細(xì)胞增殖作用，采用倒置顯微鏡、透射電子顯微鏡及瑞士-吉姆薩染色檢測(cè)OC3細(xì)胞經(jīng)SAHA、PTX單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用處理后，細(xì)胞形態(tài)的變化，細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變，應(yīng)用AO/EB雙染色法檢測(cè)各組間

4、細(xì)胞酸性囊泡的變化，并用Q-PCR進(jìn)一步檢測(cè)細(xì)胞自噬相關(guān)基因ARHI及Beclin-1的表達(dá)變化，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3B的表達(dá)變化，以及Western-blot檢測(cè)自噬蛋白Beclin-1的表達(dá)。
　　結(jié)果表明: SAHA聯(lián)合PTX組較兩藥單獨(dú)組，應(yīng)用于人卵巢癌細(xì)胞株OC3具有顯著抑制細(xì)胞增殖的作用(P＜0.05)，并存在時(shí)間和劑量效應(yīng)關(guān)系;聯(lián)合用藥組細(xì)胞形態(tài)改變明顯，細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著改變，自噬小體出現(xiàn)增多，酸性囊

5、泡亦增多;Q-PCR結(jié)果顯示，SAHA聯(lián)合PTX較各自單獨(dú)用藥組可明顯增強(qiáng)ARHI及Beclin-1基因表達(dá)(P＜0.05)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)SAHA單藥組LC3 B蛋白表達(dá)量增高并與藥物濃度呈正相關(guān)(P＜0.05)，Western-blot結(jié)果證實(shí)，SAHA聯(lián)合PTX較各自單獨(dú)組Beclin-1蛋白表達(dá)顯著增強(qiáng)。
　　結(jié)論:上述研究結(jié)果提示SAHA單獨(dú)及聯(lián)合PTX具有抑制人卵巢癌細(xì)胞株OC3增殖的作用，并可誘導(dǎo)自噬發(fā)生，兩藥聯(lián)合應(yīng)