siRNA靶向VEGF聯(lián)合紫杉醇對子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞株的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究目的：觀察siRNA靶向VEGF聯(lián)合紫杉醇對子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞株的影響。
　　 研究方法：設(shè)計針對VEGF基因的小干擾RNA(siRNA)，采用陽離子脂質(zhì)體LipfectamineTM2000將siRNA片段導(dǎo)入Ishikawa細胞中；MTT法檢測不同濃度紫杉醇對細胞增殖的影響；將Ishikawa細胞分為空白對照組、siRNA-N轉(zhuǎn)染組、siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染組、紫杉醇組、siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染+紫杉醇組，采

2、用Realtime-PCR和Westernblotting分別檢測VEGF在mRNA和蛋白水平上表達的變化，用流式細胞技術(shù)檢測凋亡率及細胞周期分布情況；用Transwell小室檢測細胞體外侵襲能力。
　　 研究結(jié)果：siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染組、紫杉醇組和siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染+紫杉醇組均可明顯下調(diào)Ishikawa細胞VEGF分子表達水平，抑制細胞增殖，誘導(dǎo)凋亡，降低細胞侵襲能力，且siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染+紫杉醇組作用最顯著。

3、對細胞周期的影響表現(xiàn)為紫杉醇組和siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染+紫杉醇組細胞阻滯在G2/M期；siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染組細胞阻滯在G0/G1期。而作為對照的錯義序列siRNA-N轉(zhuǎn)染組和空白對照組則沒有上述效應(yīng)。
　　 結(jié)論：靶向VEGF的siRNA可有效下調(diào)VEGF的表達；siRNA-VEGF轉(zhuǎn)染細胞聯(lián)合紫杉醇具有協(xié)同效應(yīng)，可顯著降低Ishikawa細胞VEGF的表達，抑制細胞增殖，降低細胞侵襲能力，將細胞周期阻滯于G2/M期促進細

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