基于殼聚糖的口服胰島素制劑的制備及性質(zhì)研究.pdf

1、胰島素是目前治療糖尿病的主要藥物，皮下注射一直是糖尿病患者的主要給藥途徑，然而長期注射胰島素給患者帶來不便與痛苦，極大地降低了患者的順從性?？诜o藥方便合理、易于被患者接受，是一種理想的給藥方式，但是，胰島素是蛋白類生物大分子藥物，口服給藥需要克服生理障礙、酶障礙及物理化學(xué)穩(wěn)定性等。因此，需要借助生物相容性好、無細(xì)胞毒性的載體材料將胰島素制成緩控釋制劑，這樣不僅可以避免胃酸及胃蛋白酶對胰島素的破壞降解，提高生物利用度，還可以延緩胰島素在

2、體內(nèi)的作用時間，減少給藥次數(shù)。
　　本文首先通過共價偶聯(lián)的方法將親水的聚乙二醇(PEG)接枝到具有良好生物相容性、安全無毒的天然陽離子高分子殼聚糖(CS)上，合成出水溶性的聚乙二醇化殼聚糖(PEG-CS)。通過紫外光譜(UV)、熒光光譜和圓二色光譜(CD)研究PEG-CS與胰島素的相互作用，結(jié)果表明，PEG-CS的加入所引起的微環(huán)境變化不會改變胰島素的二級結(jié)構(gòu)。然后，以PEG-CS為載體材料，運(yùn)用乳化交聯(lián)法和擴(kuò)散填充法制備出載胰島

3、素PEG-CS微球，用掃描電鏡(SEM)觀察其形貌，并對其進(jìn)行體外控制釋放研究，用糖尿病NOD小鼠評價載藥微球的降血糖作用。實驗結(jié)果顯示:PEG-CS微球形貌規(guī)整、粒徑均一;其對胰島素的載藥量為35 U/100 mg;在模擬腸液中具有明顯的緩釋功能，且釋放出的胰島素保持原有的生物活性;小鼠經(jīng)口服給藥后藥理相對利用度大約為5.82％，具有明顯的降血糖效果且持續(xù)時間超過24小時，為胰島素的口服給藥提供了一種潛在的載體形式。
　　選用生

4、物相容性優(yōu)良、生物可降解的聚乳酸羥基乙酸共聚物(PLGA)作為載體材料，通過W/O/W型雙乳化-溶劑揮發(fā)法制備載胰島素PLGA微球，并設(shè)計4因素4水平的正交實驗系統(tǒng)考察微球制備過程中各個因素對包封率和載藥量的影響。將實驗結(jié)果直觀分析顯示:微球的最佳制備條件是水油比1∶10，PLGA濃度40 mg/ml，胰島素濃度20 mg/ml，PEG-CS濃度0.1 mg/ml。所得優(yōu)化載藥微球用透射電鏡(TEM)觀察表面形貌，在模擬胃腸液中探究其體

5、外藥物釋放動力學(xué)，并用MTT法檢測載藥微球?qū)aco-2細(xì)胞的抑制作用，用倒置熒光顯微鏡觀察Caco-2細(xì)胞對微球的吸收情況。實驗結(jié)果顯示:優(yōu)化載藥微球的包封率為40.61％，載藥量為2.41％;形貌呈規(guī)整圓球形，表面光滑無孔;在模擬腸液中釋放緩慢，在模擬胃液中突釋嚴(yán)重，經(jīng)CD光譜分析釋放出的胰島素保持原有生物活性;細(xì)胞抑制實驗表明PLGA對細(xì)胞沒有毒性，細(xì)胞吸收實驗證明PLGA微球能被Caco-2細(xì)胞吸收。
　　為改善胰島素在模

6、擬胃腸液中過快或過慢地不合理釋放，選擇中空管狀結(jié)構(gòu)的天然納米管埃洛石(HNTs)作為胰島素的載體材料。首先考察埃洛石與胰島素的質(zhì)量比以及胰島素溶液的pH值對胰島素負(fù)載量的影響，接著將載藥HNTs與PEG-CS通過靜電相互作用制備成HNTs/PEG-CS復(fù)合物，同時采用腸溶包衣材料羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMCP)與HNTs或HNTs/PEG-CS復(fù)合物進(jìn)行復(fù)合，通過FTIR、能譜(EDS)、SEM和TEM對三種復(fù)合物進(jìn)行表征。最

7、后，分別研究載胰島素埃洛石(INS/HNTs)和幾種不同載胰島素復(fù)合物(INS/HNTs/PEG-CS、INS/HNTs/HPMCP、INS/HNTs/PEG-CS/HPMCP)在模擬胃腸液中的體外藥物釋放行為，用Folin-酚法和紫外吸收法測定溶液中胰島素的濃度。實驗結(jié)果表明:INS/HNTs在模擬胃腸液中具有微弱的緩釋作用，INS/HNTs/PEG-CS復(fù)合物在模擬腸液中有一定的緩釋作用，而INS/HNTs/HPMCP和INS/HN