胰島素磷脂復(fù)合物口服微乳的制備及體內(nèi)外評(píng)價(jià).pdf

1、一、目的
　　 胰島素是一種多肽蛋白質(zhì)類藥物，其口服給藥一直是現(xiàn)代藥劑學(xué)的研究熱點(diǎn)和難點(diǎn)，而在眾多的制劑手段中，微乳被認(rèn)為是應(yīng)用前景較好的一種給藥系統(tǒng)。由于胰島素是親水性藥物，一般載于微乳的水相，對(duì)于O/W微乳，藥物載于微乳外相，口服后會(huì)被胃腸道中的酶降解失活，對(duì)于W/O微乳，口服后被胃腸道中大量消化液稀釋而轉(zhuǎn)相，藥物仍會(huì)被降解失活。故本課題擬采用磷脂復(fù)合物技術(shù)，使胰島素與磷脂形成胰島素磷脂復(fù)合物(insulin-phospho

2、lipid complex, IPC)，增加胰島素的脂溶性，制備出胰島素載于油相的微乳，以減少口服后胰島素的降解失活，從而提高胰島素口服生物利用度，為胰島素這種多肽蛋白質(zhì)類藥物口服制劑的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　 二、方法與結(jié)果
　　 1.胰島素磷脂復(fù)合物的制備及表征
　　 以含5％冰醋酸的DMSO為溶劑，采用冷凍干燥法制備胰島素磷脂復(fù)合物。以透光率為指標(biāo)，篩選磷脂/胰島素的比例和油相，以紅外光譜和X射線衍射分析驗(yàn)證復(fù)

3、合物的形成，最后以皮下注射后的降血糖效果來考察復(fù)合物制備過程對(duì)胰島素生物活性的影響。結(jié)果顯示磷脂/胰島素質(zhì)量比為(32∶1)，油相為油酸乙酯時(shí)，胰島素溶解較完全，紅外光譜和X射線衍射分析驗(yàn)證了胰島素磷脂復(fù)合物的形成，皮下注射后的降血糖效果顯示，復(fù)合物的制備過程對(duì)胰島素生物活性沒有顯著影響。
　　 2.胰島素磷脂復(fù)合物W/O、O/W微乳的制備及表征
　　 以油酸乙酯為微乳油相，通過偽三元相圖法篩選表面活性劑、助表面活性劑、

4、Km值等處方因素，確定了胰島素磷脂復(fù)合物W/O、O/W微乳的空白處方分別為:[Lecithin∶乙醇∶油酸乙酯∶水=26.67∶26.67∶35.55∶11.11（m/m/m/m）]、[EL35∶1，2-丙二醇∶油酸乙酯∶水=18.18∶6.06∶6.06∶69.70(m/m/m/m)]，所制得的IPC-W/O、IPC-O/W微乳的粒徑分別為27.3nm和18.6nm，多分散系數(shù)分別為0.117和0.141，載藥量分別為769.78±0

5、.86μg·mL-1和216.5±0.57μg·mL-1。胰島素磷脂復(fù)合物微乳室溫放置30天含量出現(xiàn)一定下降，4℃下基本穩(wěn)定。
　　 3.胰島素磷脂復(fù)合物微乳的體外評(píng)價(jià)
　　 通過體外酶降解實(shí)驗(yàn)和Caco-2細(xì)胞模型上的轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)對(duì)胰島素磷脂復(fù)合物口服微乳進(jìn)行體外評(píng)價(jià)。體外酶降解實(shí)驗(yàn)顯示，磷脂復(fù)合物微乳對(duì)胃蛋白酶、胰蛋白酶均具有顯著的抗酶降解作用，IPC-W/O微乳保護(hù)作用顯著強(qiáng)于IPC-O/W微乳，保護(hù)作用順序?yàn)?IPC

6、-W/O微乳＞ IPC-O/W微乳＞復(fù)合物。Caco-2細(xì)胞模型上的轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)顯示，與胰島素溶液組相比，復(fù)合物、IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳組的表觀通透系數(shù)均有一定程度的增大，以胰島素溶液為對(duì)照組所得的轉(zhuǎn)運(yùn)促進(jìn)率R分別為1.26，1.48和1.50，IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳組大于復(fù)合物組，而IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳組之間則無顯著差別。
　　 4.胰島素磷脂復(fù)合物微乳的體內(nèi)評(píng)價(jià)
　　 通

7、過STZ糖尿病大鼠模型上的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)胰島素磷脂復(fù)合物口服微乳進(jìn)行體內(nèi)評(píng)價(jià)。成模大鼠隨機(jī)分為5組，分別口服IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳、復(fù)合物(50IU·kg-1)，皮下注射胰島素溶液(1IU·kg-1)和不給藥為對(duì)照組，與對(duì)照組相比，IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳、復(fù)合物組血糖均出現(xiàn)不同程度下降，降糖效果為IPC-W/O微乳＞IPC-O/W微乳＞復(fù)合物，血糖最低值分別為初始值的66.7％、70.8％、82.02％，以

8、皮下注射胰島素組為參比，IPC-W/O微乳、IPC-O/W微乳、復(fù)合物組的口服藥理相對(duì)生物利用度分別為2.4％、1.8％、1.6％，相比皮下注射胰島素組，IPC-W/O微乳組降糖作用更持久。體內(nèi)藥效學(xué)研究顯示胰島素磷脂復(fù)合物微乳特別是IPC-W/O微乳口服后具有顯著降糖作用，表明此給藥系統(tǒng)能增加胰島素的口服吸收，用于胰島素口服給藥具有一定前景。
　　 三、結(jié)論
　　 本文以磷脂復(fù)合物技術(shù)，制備出胰島素載于油相的IPC-W