虎眼萬年青天然產(chǎn)物糖苷生物合成關(guān)鍵酶基因的克隆和功能研究.pdf

1、天然產(chǎn)物的糖基化在植物、微生物產(chǎn)生天然小分子化合物時普遍存在。糖基化對于化合物的理化性質(zhì)、藥理活性等方面有重大影響。天然產(chǎn)物的糖基化由糖基轉(zhuǎn)移酶執(zhí)行，在植物和微生物中存在大量的糖基轉(zhuǎn)移酶執(zhí)行不同的糖基化功能，深入挖掘這些糖基轉(zhuǎn)移酶的性質(zhì)與功能，對于以合成生物學(xué)手段生產(chǎn)天然小分子化合物糖苷提供功能元件有重大幫助。
　　糖基轉(zhuǎn)移酶的底物有糖基供體和糖基受體兩種，在植物和微生物中存在結(jié)構(gòu)多樣的天然產(chǎn)物，為糖基轉(zhuǎn)移酶提供多樣化的糖基受體;

2、同時，在生物體中存在復(fù)雜的糖基供體生物合成代謝網(wǎng)絡(luò)，為糖基轉(zhuǎn)移酶提供多樣化的糖基供體，其中UDP-糖為重要的糖基供體類型。
　　本文圍繞多樣化的天然小分子化合物糖苷的生物合成，從虎眼萬年青（Ornithogalum caudatum）中克隆得到了UDP-木糖、UDP-阿拉伯糖、UDP-半乳糖、UDP-半乳糖醛酸、UDP-鼠李糖等糖基供體生物合成中的關(guān)鍵酶基因17條(OcUXS1-6、OcUAXS1/2、OcUGE1/2、OcUXE

3、1/2、OcRHM1、OcNER1、OcGlcAE1/2/3)，并對其進(jìn)行了功能研究、酶學(xué)特征研究、植物組織表達(dá)分析等研究;并從虎眼萬年青（Ornithogalum caudatum）中克隆得到了28條可能的糖基轉(zhuǎn)移酶基因，并對其中三個基因(OcUGT1/2/3)進(jìn)行了功能研究，獲得了具有底物寬泛性特點(diǎn)的糖基轉(zhuǎn)移酶。
　　本研究通過基因克隆、蛋白表達(dá)、功能鑒定的方法獲得了糖基供體生物合成途徑及代謝網(wǎng)絡(luò)中的多條關(guān)鍵酶，為天然產(chǎn)物糖苷