沙參麥冬湯的化學(xué)成分分析和藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、古方沙參麥冬湯源于清代吳鞠通的《溫病條辨》，由北沙參、麥冬、玉竹、天花粉、白扁豆、桑葉和甘草7種藥味組成，其中北沙參和麥冬為君藥，玉竹和天花粉為臣，白扁豆和桑葉為佐，甘草為使。該方劑具有清養(yǎng)肺胃和潤(rùn)燥生津的功效，主治溫?zé)岷驮餆嶂皞约胺挝戈幏种Y，是甘寒法治療溫燥證的代表方之一。
　　本研究建立了可靠、靈敏、簡(jiǎn)便的液質(zhì)聯(lián)用（UPLC-MS/MS）方法同時(shí)測(cè)定沙參麥冬湯中的9種有效成分，并首次建立同時(shí)測(cè)定沙參麥冬湯中3種有效成分體

2、內(nèi)藥物濃度的UPLC-MS/MS方法，進(jìn)行單劑量藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)，分別計(jì)算各自的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，為沙參麥冬湯的質(zhì)量控制的深入研究及后期的劑型改造研究奠定了基礎(chǔ)，為研究中藥復(fù)方制劑活性成分的體內(nèi)過(guò)程及其藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考依據(jù)，為中藥古方沙參麥冬湯的現(xiàn)代臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。
　　第一部分沙參麥冬湯的化學(xué)成分的定量分析方法研究
　　目的：建立測(cè)定沙參麥冬湯中蘆丁、甘草苷、補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手苷內(nèi)酯、甘草酸銨、麥冬皂苷D、甲基麥冬二氫

3、高異黃酮A、甲基麥冬二氫高異黃酮B含量的方法。
　　方法：采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。色譜柱為 Phenomenex Kenetix C18柱（50 mm×3 mm,2.6μm），流動(dòng)相為乙腈-0.1％甲酸水溶液（梯度洗脫），柱溫為25℃，流速為0.3 mL·min-1；以電噴霧離子源（ESI）模式的多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）掃描方式進(jìn)行分析測(cè)定。
　　結(jié)果：蘆丁、甘草苷、補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手苷內(nèi)酯、甘草酸銨、麥冬皂苷

4、D、甲基麥冬二氫高異黃酮A和甲基麥冬二氫高異黃酮B的檢測(cè)進(jìn)樣量線性范圍分別為1.75~700、5.00~1997、0.95~380、1.75~700、2.00~800、7.00~2799、2.38~950、0.38~151、0.43~171 ng·mL-1（r分別為0.9992，0.9997，0.9990，0.9991，0.9998，0.9993，0.9995，0.9997，0.9990）；精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的 RSD＜3.0％

5、。被測(cè)物加樣回收率范圍為95.1%~104.6%，RSD分別為2.3%、2.9%、2.1%、3.0%、1.2%、2.9%、1.9%、2.6%和2.8%。
　　結(jié)論：本方法快速、簡(jiǎn)便、專屬性好、靈敏度高，可用于沙參麥冬湯中9種有效成分的含量測(cè)定，為沙參麥冬湯的質(zhì)量控制和物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了依據(jù)。
　　第二部分沙參麥冬湯中3種有效成分藥代動(dòng)力學(xué)研究
　　目的：建立大鼠血漿中甘草苷、花椒毒素和甲基麥冬二氫高異黃酮A的UPLC-

6、MS/MS測(cè)定方法，并探討大鼠灌胃沙參麥冬湯后其在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過(guò)程。
　　方法：大鼠單劑量灌胃沙參麥冬湯提取物12 mL·kg-1后0.03、0.08、0.17、0.33、0.66、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12和24 h點(diǎn)采血，UPLC-MS/MS測(cè)定受試成分0~24 h血藥濃度，流動(dòng)相乙腈-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脫，流速0.3 mL·min-1；采用ESI源，正負(fù)離子同時(shí)檢測(cè)模式掃描，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM

7、)檢測(cè)各成分血藥濃度，并用DAS3.0軟件計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：甘草苷、花椒毒素和甲基麥冬二氫高異黃酮 A分別在4.92~315.00 ng·mL-1（r=0.9991）、1.44~92.00 ng·mL-1（r=0.9994）和0.35~22.00 ng·mL-1（r=0.9992）線性關(guān)系良好，平均回收率均大于76.5%，日內(nèi)、日間RSD均小于15%。3種被分析物血漿樣品反復(fù)凍融3次、-20℃放置15 d、室溫放置4h以

8、及血漿樣品處理后的分析物放置12 h的穩(wěn)定性均良好，日內(nèi)、日間變異系數(shù)（RSD）小于15.0%，精密度和準(zhǔn)確度等均符合生物樣品分析的要求。大鼠灌胃沙參麥冬湯提取物后，甘草苷、花椒毒素和甲基麥冬二氫高異黃酮 A的 AUC0-t分別為(718.23±185.55),(22.52±7.53),和(13.55±6.03) ng·h·mL-1;T1/2分別為3.61±2.01，6.93±7.78和3.51±1.92 h。
　　結(jié)論：本法快捷