脾虛4號方對功能性腹瀉脾虛證的療效及作用機制的研究.pdf

1、目的:通過檢測脾虛4號方干預功能性腹瀉脾虛證大鼠結(jié)腸組織5-羥色胺（5-HT）及其受體、C型鈉尿肽及其受體以及胰高血糖素肽1受體的變化，來探討它們與功能性腹瀉脾虛證之間的關(guān)系，及脾虛4號方的療效情況和可能的作用機制。
　　方法:60只清潔級三周齡wistar大鼠隨機分為正常對照組、模型組、陽性對照組和脾虛4號方治療組各15只。采用高乳糖飼料喂養(yǎng)及水環(huán)境小平臺站立法構(gòu)建功能性腹瀉脾虛動物模型。造模2周，采血、取尿，檢測血清乳酸、淀粉

2、酶，尿D-木糖排泄率檢測評價造模是否成功。造模成功后，脾虛4號方組和陽性對照組連續(xù)給藥7天，正常對照組和模型組生理鹽水對照。實驗全程對大鼠進行一般指標及行為學觀察。一周后麻醉活體取結(jié)腸組織，制備分子生物學及病理學標本。運用免疫組化、實時定量PCR和蛋白印記(Western blotting)技術(shù)檢測5-HT及其受體、C鈉尿肽及其受體以及胰高血糖素肽1受體的變化情況。
　　結(jié)果:1、功能性腹瀉脾虛證大鼠結(jié)腸5-HT含量升高，蛋白水平

3、檢測顯示:模型組與正常對照組相比5-HT3受體無明顯變化;模型組5-HT4受體表達增加，5-HT7受體表達下降與正常對照組相比有顯著性差異。mRNA水平表達結(jié)果顯示模型組5-HT3受體表達降低，5 HT4受體表達增加，5-HT7受體表達下降，與正常組相比有顯著性差異。經(jīng)脾虛4號方干預后，脾虛4號方組5-HT3受體在蛋白水平和mRNA水平表達無明顯變化，5-HT4受體在蛋白水平和mRNA水平表達均下降，與模型組相比有顯著性差異，5-HT7

4、受體蛋白水平表達增加，mRNA水平表達量差異無顯著性。
　　2、功能性腹瀉脾虛證大鼠結(jié)腸CNP含量下降，在模型組，蛋白水平和mRNA水平表達CNP及其受體NPR-B表達均下降，與正常對照組相比有顯著性差異。經(jīng)脾虛4號方干預后，脾虛4號方組CNP蛋白水平和mRNA水平表達量與模型組相比無顯著性差異;NPR-B表達均升高。
　　3、功能性腹瀉脾虛證大鼠結(jié)腸胰高血糖素肽1受體在蛋白水平明顯降低，與對照組相比有顯著性差異。經(jīng)脾虛4號