PCR測(cè)序技術(shù)在ABO亞型鑒定和丙酮酸激酶缺乏癥診斷中的應(yīng)用.pdf

1、ABO血型系統(tǒng)是臨床輸血醫(yī)學(xué)和移植醫(yī)學(xué)中最重要的血型系統(tǒng)，ABO血型的各種亞型造成臨床血型鑒定困難，某些情況下可能使患者無法及時(shí)接受輸血治療或器官移植，延誤治療時(shí)機(jī)，甚至嚴(yán)重威脅患者生命。
　　丙酮酸激酶缺乏癥是一種常見的紅細(xì)胞酶缺陷性疾病，主要引起慢性非球形紅細(xì)胞溶血性貧血，為常染色體隱性遺傳。
　　PCR測(cè)序采用傳統(tǒng)的Sanger測(cè)序法，其本身所具有的準(zhǔn)確性高、易于標(biāo)準(zhǔn)化操作等優(yōu)點(diǎn)使其被廣泛的應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)診斷，大大提高

2、了診斷的特異性和靈敏度。
　　本研究主要是通過PCR測(cè)序技術(shù)對(duì)臨床工作中遇到的ABO血型系統(tǒng)亞型及單基因遺傳病給予基因診斷。通過收集先證者臨床信息，對(duì)先證者臨床表型進(jìn)行分析，收集患者外周血進(jìn)行DNA的提取，設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增、測(cè)序，進(jìn)而利用生物信息學(xué)軟件對(duì)先證者基因型進(jìn)行分析，實(shí)現(xiàn)PCR技術(shù)在臨床檢驗(yàn)診斷中的應(yīng)用。
　　在對(duì)一例B(A)亞型的研究中，發(fā)現(xiàn)該患者ABO基因存在多個(gè)變異，其第6外顯子區(qū)存在261del和c.2

3、97A>G二處雜合變異，第7外顯子區(qū)存在c.526C>G、c.640A>G、c.646T>A、c.657C>T、c.681G>A、c.703G>A、c.771C>T、c.796C>T、c.803G>C、c.829G>A、c.930G>A十一處雜合變異，以A101等位基因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比較，對(duì)照Blood Group Antigen Gene Mutation Database進(jìn)行ABO等位基因突變分析，判斷患者血型為B(A)04/O06