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文檔簡介
1、背景:
原發(fā)性皮膚惡性黑素瘤(primary cutaneous malignant melanoma,PCMM)是一種高度惡性的皮膚腫瘤,也是臨床常見的皮膚腫瘤之一,其發(fā)病率低,隨著社會環(huán)境惡化、生活習慣改變及人口的老齡化,近年來黑素瘤的發(fā)病也逐年成倍增長,每年約2萬新發(fā)病例。因為腫瘤的惡性程度較高,通過淋巴或血道轉(zhuǎn)移發(fā)生早,而轉(zhuǎn)移后治療效果較差導(dǎo)致死亡率高,故黑素瘤早期診斷、早期治療對整個病情的控制及預(yù)后很重要。RhoC(
2、Ras homology C)蛋白是小分子G蛋白超家族中的Rho亞族的蛋白之一,也在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起到重要的作用。細胞的分裂增殖、細胞骨架的活動、細胞的活動性、腫瘤血管生成及細胞周圍基質(zhì)的降解等,這些過程對腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有十分重要的作用,RhoC可通過對下游靶效應(yīng)分子作用調(diào)節(jié)影響上述過程。研究表明RhoC在乳腺癌、卵巢癌、食管鱗狀細胞癌、胰腺癌、胃癌、肝癌等多種惡性腫瘤中的表達上調(diào),并與腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移的程度相關(guān)。Rho相關(guān)卷曲螺旋形成
3、蛋白激酶(Rho associated coiled coil forming protein kinase,ROCK)作為RhoC蛋白的下游效應(yīng)分子之一,屬于絲氨酸/蘇氨酸家族蛋白激酶的重要成員之一,通過依靠GTP與Rho家族蛋白相互結(jié)合,在多種細胞生物學(xué)過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用,參與肝癌、胃癌、食管鱗癌等多種腫瘤的發(fā)展過程。
研究表明RhoC和ROCK1在多種腫瘤中發(fā)揮重要生物學(xué)功能,且兩者之間具有相似的調(diào)節(jié)特性,但二者是
4、否參與黑素瘤的發(fā)展過程國內(nèi)暫無研究報道。為此,本文采用免疫組織化學(xué)SP法,分別觀察RhoC與ROCK1在皮膚惡性黑素瘤及痣細胞痣組織中的表達情況及二者與黑素瘤臨床病理特征的關(guān)系,初步探討RhoC與ROCK1在黑素瘤發(fā)病機制過程中的可能發(fā)揮的作用及表達相關(guān)性。
目的:
分別檢測RhoC、ROCK1在皮膚惡性黑素瘤及痣細胞痣組織中的表達,對兩者在皮膚惡性黑素瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中的可能發(fā)揮的作用及兩者之間的相互關(guān)系進行探討
5、。
材料與方法:
1.材料來源:隨機取于2007至2014年鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科存檔的臨床及病理資料完善的90例原發(fā)性皮膚黑素細胞腫瘤(皮膚及淋巴組織蠟塊標本),其中60例原發(fā)性皮膚惡性黑素瘤,痣細胞痣30例。根據(jù)患者的臨床及病理資料進行統(tǒng)計分析,包括年齡、病程、Clark分級及TNM分期等,
2.方法:采用免疫組化SP法檢測60例黑素瘤組織和30例痣細胞痣組織中RhoC、ROCK1蛋白的表達,具體步
6、驟參照試劑盒說明。陰性對照用PBS代替一抗。RhoC和ROCK1陽性對照由試劑公司提供。
3.統(tǒng)計學(xué)分析:數(shù)據(jù)采用 SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。采用x2檢驗對RhoC、ROCK1蛋白在原發(fā)黑素瘤、轉(zhuǎn)移黑素瘤和痣細胞痣組織中的陽性率進行分析,相關(guān)性分析采用spearman相關(guān)分析法,檢驗水準為α=0.05。
結(jié)果:
1.RhoC蛋白在皮膚惡性黑素瘤、痣細胞痣組織中的表達
RhoC陽性表達主要
7、定位于細胞漿和(或)細胞膜,呈棕黃或黃褐色顆粒,以彌漫性分布為主。RhoC在皮膚惡性黑素瘤、痣細胞痣組織中的陽性率分別為70.00%、16.67%。RhoC在黑素瘤組織中為陽性表達,在受累淋巴結(jié)中陽性表達,在痣細胞痣組織中為極弱性表達,皮膚惡性黑素瘤組與痣細胞痣組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=22.801,P=0.000)。
2.ROCK1蛋白在皮膚惡性黑素瘤、痣細胞痣組織中的表達
ROCK1陽性表達主要定位于細胞漿
8、和(或)細胞膜,呈棕黃或黃褐色顆粒,以彌漫性分布為主。ROCK1在皮膚惡性黑素瘤和痣細胞痣組織中的陽性率分別為81.67%、13.33%。ROCK1蛋白在黑素瘤組織中為陽性表達,在受累淋巴結(jié)中陽性表達,在痣細胞痣組織中為極弱性表達,皮膚惡性黑素瘤組與痣細胞痣組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=38.575,P=0.000)。
3.RhoC蛋白表達與皮膚惡性黑素瘤臨床病理的關(guān)系
60例CMM中ClarkⅠ-Ⅲ級陽性率為56
9、.25%(18/32);Ⅳ~Ⅴ級陽性率為85.71%(24/28),明顯高于前者(P<0.05)。TNMⅠ-ⅢA陽性率為58.82%(20/34);ⅢB-Ⅴ期陽性率為84.62%(22/26),明顯高于Ⅰ-ⅢA期(P<0.05)。伴有遠處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組RhoC陽性率為76.92%(10/13),無遠處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組RhoC陽性率為68.09%(32/47),兩組之間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
4.ROCK1蛋白表達與皮膚惡
10、性黑素瘤臨床病理的關(guān)系
60例CMM中Clark分級Ⅰ~Ⅲ級陽性率為75.00%(24/32);Ⅳ~Ⅴ級陽性率為92.86%(25/28),明顯高于前者(P<0.05)。TNM分期中Ⅰ-ⅢA期陽性率為73.53%(25/34);ⅢB-Ⅴ期中陽性率為92.31%(24/26),明顯高于Ⅰ-ⅢA期(P<0.05)。伴有遠處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組ROCK1陽性率為84.61%(11/13),無遠處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組ROCK1陽性率為80.85%(3
11、8/47),兩組無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
5.RhoC蛋白與ROCK1蛋白表達的相關(guān)性
經(jīng)spearman相關(guān)分析得出,黑素瘤組織中 RhoC蛋白與ROCK1蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.348, P<0.05)。
結(jié)論:
1.RhoC、ROCK1在皮膚惡性黑素瘤組織中的表達均較痣細胞痣組織明顯升高,提示二者可成為MM潛在標志物。
2.RhoC、ROCK1的表達水平均與皮膚惡性黑素
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