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1、衰老是遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。根據(jù)羰基應(yīng)激衰老學(xué)說(shuō)的觀點(diǎn),在氧自由基引起的脂質(zhì)過(guò)氧化和非酶糖基化反應(yīng)過(guò)程中,會(huì)生成具有反應(yīng)活性的共同中間產(chǎn)物——活性羰基類物質(zhì),它們能與生物體內(nèi)的幾乎所有生物大分子發(fā)生羰—氨交聯(lián),這一過(guò)程是機(jī)體內(nèi)衰老損變的核心過(guò)程,甚至是機(jī)體衰老改變的生化本質(zhì)。 本學(xué)位論文以分別代表兩個(gè)極端的正常細(xì)胞(即體外生存能力很弱的紅細(xì)胞和長(zhǎng)期生活在體外的酵母)為實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,探討它們?duì)羰基應(yīng)激的響應(yīng)差異。
2、一、血液在儲(chǔ)存過(guò)程中,血液粘度會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸上升,然而其具體生化機(jī)制仍不明了。為了探索這種血液粘度升高的機(jī)制,本文探索了血液儲(chǔ)存過(guò)程中硫醇、TBARS水平、紅細(xì)胞膜蛋白羰基化程度以及蛋白質(zhì)熒光強(qiáng)度的變化。結(jié)果顯示:伴隨著血液粘度的升高,硫醇水平與蛋白質(zhì)熒光強(qiáng)度逐漸降低,而TBARS水平與膜蛋白羰基化程度逐漸增加。這些結(jié)果表明:活性羰基類物質(zhì)很容易攻擊蛋白質(zhì)的氨基和巰基,羰基應(yīng)激誘導(dǎo)的紅細(xì)胞膜蛋白羰基化可能是血液儲(chǔ)存過(guò)程中粘度上
3、升的重要機(jī)制。二、為了探索酵母細(xì)胞對(duì)羰基應(yīng)激的響應(yīng),本文用不同濃度的MDA溶液處理酵母細(xì)胞,培養(yǎng)過(guò)夜后用紫外分光光度計(jì)在600 nm處測(cè)定培養(yǎng)過(guò)夜后酵母的光密度,同時(shí)用PI熒光染色法(Ex530/Em590)測(cè)定經(jīng)MDA處理后的酵母細(xì)胞的活力。結(jié)果顯示:即使在高濃度MDA的作用下,酵母細(xì)胞生長(zhǎng)和活力均未受到顯著抑制。這表明:酵母細(xì)胞抗羰基應(yīng)激的能力很強(qiáng),但這種抗性的具體機(jī)制仍需做進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)探討。 綜上所述,血液中的紅細(xì)胞在羰基
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