海帶中兩種植物激素的分離及其活性研究.pdf

1、對海帶(Laminaria japonica Areseh.)中的吲哚乙酸和脫落酸進(jìn)行分離純化，優(yōu)化條件，利用反相高效液相色譜(RP-HPLC)方法對它們進(jìn)行定性和定量研究，利用質(zhì)譜(APESI-MS)方法對海帶吲哚乙酸和脫落酸進(jìn)行了鑒定。在此基礎(chǔ)上，利用RP-HPLC方法，測定吲哚乙酸和脫落酸在成熟海帶的不同藻體部位中及不同生長時(shí)期的海帶中的含量，詳細(xì)研究了它們在成熟海帶中的分布及其含量與海帶不同生長時(shí)期的關(guān)系，并從生長調(diào)節(jié)作用、代謝

2、物質(zhì)含量及氧化損傷的保護(hù)作用等方面，研究了海帶吲哚乙酸和脫落酸對海洋微藻的生物學(xué)效應(yīng)。 獲得海帶吲哚乙酸的最適分離純化方法為：避光組織勻漿，勻漿液用超聲波進(jìn)行細(xì)胞破碎，90％甲醇浸提，乙醚萃取，硅膠脫色，通過Sephadex LH 20柱層析和高效液相色譜方法進(jìn)行純化。海帶脫落酸的最適分離純化方法為：組織勻漿，超聲波破碎細(xì)胞，80％甲醇浸提，乙酸乙酯萃取，硅膠脫色純化，通過Sephadex LH 20柱層析和高效液相色譜方法進(jìn)一

3、步純化。在此基礎(chǔ)上，通過RP-HPLC方法的定性分析和APESI-MS方法的分析結(jié)果確定分離目標(biāo)產(chǎn)物為吲哚乙酸和脫落酸。RP-HPLC方法的定量分析結(jié)果表明海帶吲哚乙酸的產(chǎn)量為65~95μg/kg·FW，海帶脫落酸的產(chǎn)量為65-70μg/kg·FW，該方法操作簡便，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。 研究表明，成熟海帶的不同部位對于吲哚乙酸含量的影響顯著(0.01

4、部位對于脫落酸含量的影響并不顯著(p<0.05)。海帶的不同生長時(shí)期對全海帶中吲哚乙酸和脫落酸的含量影響均極顯著(p<0.01)，其中吲哚乙酸在海帶夾苗初期的幼嫩海帶中含量最高，隨著海帶成熟，其含量逐漸減少，而脫落酸含量卻逐漸增加，在成熟期的海帶中脫落酸的含量最高。 研究表明，在0～100μmaol/L濃度范圍內(nèi)，海帶吲哚乙酸對小球藻、鹽藻和紫球藻的生長均有促進(jìn)作用；而角毛藻在外加海帶吲哚乙酸的濃度≥75μmoI/L時(shí)，細(xì)胞生長

5、被抑制。在0～200 pmol/L濃度范圍內(nèi)，海帶脫落酸對小球藻、鹽藻、球等鞭金藻和紫球藻四種海洋微藻的生長均表現(xiàn)出抑制作用，脫落酸濃度對四種海洋微藻的生長影響均顯著(0.01

6、白和葉綠素含量影響均不顯著：對于小球藻胞內(nèi)可溶性蛋白和葉綠素的含量影響顯著(0.010.05)。海帶脫落酸對紫球藻胞內(nèi)可溶性蛋白及胞內(nèi)可溶性糖含量影響均極顯著(0.0010.05)；對小球藻胞內(nèi)可溶性蛋白含量影響顯著(0.0l