幾種植物的殺蟲抑菌活性及其成分研究.pdf

1、為了減少病蟲害給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成的損失，人們不斷加大農(nóng)藥的施用量?；瘜W(xué)農(nóng)藥的濫用引發(fā)了人們對環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品安全的憂慮。為了篩選、創(chuàng)制對人畜安全、環(huán)境友好的新型生物農(nóng)藥，本文對中華獼猴桃、狗棗獼猴桃的殺蟲活性、40種雜草和9種中草藥的抑菌活性進(jìn)行了篩選，并對中華獼猴桃石油醚萃取物的成分，特別是在活性追蹤指導(dǎo)下對高活性的抑菌植物水菖蒲的活性成分進(jìn)行了分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定。簡述如下。 1.對采自陜西鳳翔的中華獼猴桃(Actinidia chi

2、nensis)和山東青島的狗棗獼猴桃(Actinidia kolomikta)對小菜蛾(Plutella xylostella L.)的殺蟲活性進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究。發(fā)現(xiàn)在6種溶劑中，丙酮是最適的提取溶劑。而在3種萃取溶劑中，石油醚是最適的萃取溶劑。其中中華獼猴桃莖丙酮提取物對小菜蛾應(yīng)用浸蟲法在48h的校正死亡率達(dá)到79.6％，24h時(shí)也達(dá)到73.3％。劑量效應(yīng)試驗(yàn)表明，中華獼猴桃莖部丙酮提取物48h的LC50為40.85g·L-1，2

3、4h為49.04g·L-1(以粗提物定量)。而葉丙酮提取物48h和24h的LC50為74.07和67.28g·L-1(以粗提物定量)?；钚猿煞值某醪椒蛛x表明，石油醚萃取物中含有中華獼猴桃莖丙酮粗提物的大部分殺蟲物質(zhì)。對中華獼猴桃莖的石油醚萃取物進(jìn)行的LC MS分析表明，豐度比較高的成分有：棕櫚酸、珠光脂酸、植物醇、亞油酸、十六碳三烯酸、硬脂酸。 而狗棗獼猴桃活性最高的部位是根皮，其丙酮粗提物48h和24h對小菜蛾的LC50分別為

4、1.97和2.14g·mL-1(以植物干粉定量)。 2.應(yīng)用抑制菌絲生長速率法篩選了采自山東濟(jì)南的40種雜草的丙酮提取物對辣椒疫霉(Phytophthora capsici)、瓜果腐霉(Pythiumaphanidermatum)、尖鐮孢菌(Fusarium oxysporium)、茄鐮孢菌(Fusariumsolani)和灰葡萄孢(Botrytis cinema)的抑菌活性。共有13種雜草至少對1種病原菌的抑制率在60％以上，

5、占供試植物的32.5％。其中，對5種病原菌抑菌效果都較好的有黃花蒿(Artemisia annua)和蒼耳(Xanthiumsibiricum);對4種病原菌抑菌效果較好的有荔枝草(Salvia plebeian)；鱧腸(Eclipta prostrata)對3種病原菌即辣椒疫霉、瓜果腐霉和尖孢鐮刀菌的抑菌效果較好；對2種病原真菌效果較好的有夏至草(Lagopsis supine)和地黃(Rehmannia glutinosa)；對1種

6、病原菌效果較好的有播娘蒿(Descurainia sophia)、齒果酸模(Rumex dentatus)、車前(Plantagoasiatica)、澤漆(Euphorbia helioscopia)、蓼(Polygonum sp.)、苣荬菜(Sonchus brachyotus)和小飛蓬(Conyza Canadensis)。這些雜草中，黃花蒿、蒼耳、荔枝草等幾種植物抑菌譜廣、抑制率高，具有進(jìn)一步研究的價(jià)值。 3.應(yīng)用抑制菌絲

7、生長速率法篩選了9種中藥的水提物和丙酮提取物對辣椒疫霉(Phtophthora capsici)、瓜果腐霉(Phthium aphanidermatum)、尖鐮孢菌(Fusarium oxysporium)、茄鐮孢菌(Fusarium solani)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的抑制作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，水提物的活性不如丙酮提取物的活性高。其中水菖蒲(Acorus calamus L)丙酮提取物對5種病原真菌都有較好的抑制活

8、性，且抑制率在88.56～100.00％之間?；ń?Zanthoxylum bungeanum)和虎杖(Polygonum cuspidatum)的丙酮提取物對3種病原真菌的活性較好。而對2種病原真菌效果較好的有艾葉(Artemisia indica)和鶴虱(Fructus carpesii)。EC50試驗(yàn)表明，水菖蒲活性最高，其粗提物對辣椒疫霉(P.capsici)的EC50達(dá)到了46.74 mg·L-1，對灰葡萄孢(B.cinere

9、a)和尖鐮孢菌(F.oxysporium)的EC50則分別為186.89mg·L-1和236.01mg·L-1，對茄鐮孢菌(F.solani)和瓜果腐霉(P.aphanidermatum)的EC50也分別達(dá)到了280.76和306.78 mg·L-1，是一種很有前景的抑菌植物?；⒄葘苯芬呙?P.capsici)、瓜果腐霉(P。aphanidermatum)和茄鐮孢菌(F.solani)的EC50分別為1.18g·L-1、2.08g·L

10、-1和2.14 g·L-1?；ń穼忡犳呔?F.oxysporium)、瓜果腐霉(P。aphanidermatum)和灰葡萄孢(B.cinema)的EC50則分別為0.27g·L-1、1.29 g·L-1、1.53g·L-1。 4.以活性追蹤為指導(dǎo)，對水菖蒲(Acorus calamus)的抑菌活性成分進(jìn)行了分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定。對4種病原真菌的活性測定表明，在甲醇、丙酮和石油醚的提取物中，石油醚是最適的提取溶劑。對其乙醇粗提物進(jìn)

11、行液液萃取，也是石油醚萃取物活性最高。應(yīng)用200～300目和H硅膠進(jìn)行柱層析，并對每一步得到的流分進(jìn)行活性測定。綜合運(yùn)用萃取、硅膠柱層析、TLC、HPLC等方法，分離到代號為LCb2的化合物。LCb2對辣椒疫霉(P.capsic)的EC50為27.84mg·L-1，回歸方程為Y=1.6189+2.3403X。該化合物呈油狀，淡黃色，溶于石油醚、乙酸乙酯、氯仿。應(yīng)用UV、IR、MS、H-NMR和C-NMR以及2D-NMR(COSY、HSQ

12、C、HMBC)并比對文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，確定LCb2為順式-細(xì)辛醚(cis-asarone)。與水菖蒲粗提物相比，LCb2的EC50僅提高不到1倍，因此認(rèn)為水菖蒲粗提物的高抑菌活性是由于細(xì)辛醚的高含量導(dǎo)致的。細(xì)辛醚的順式異構(gòu)體對辣椒疫霉(P.capsic)的活性是反式異構(gòu)體的62.75倍，說明順反異構(gòu)對活性有著決定性的影響。本文的創(chuàng)新點(diǎn)主要在于：系統(tǒng)的研究了水菖蒲的抑菌活性，特別是在活性追蹤指導(dǎo)下對其抑菌成分進(jìn)行了分離純化并鑒定了其化學(xué)結(jié)構(gòu)。發(fā)現(xiàn)