海帶多糖的分離純化及活性研究.pdf

1、傳統(tǒng)的海帶多糖的提取方法包括：熱水提取法、酶提取法、堿提取法，而這些提取方法都存在一定的缺陷。熱水提取的方法采用的溫度是70～80℃，耗能多，提取時間長。酶提取的方法提取的時間長，工業(yè)生產(chǎn)需要使用的酶量大，不經(jīng)濟。堿提取法是現(xiàn)在工業(yè)提取海帶多糖的主要方法，但是堿提取方法會造成多糖生物活性的降低。因此尋找合適的提取方法來降低能耗，提高海帶多糖的提取率以及活性變得越來越重要。為達到這一目的，本研究采用超聲波方法來提取海帶多糖，隨后對其理化性

2、質(zhì)和生物學活性進行檢測，并與傳統(tǒng)方法進行比較，以期得到海帶多糖提取的最佳方法。 首先采用了傳統(tǒng)方法來提取海帶多糖，獲得的多糖測定其理化性質(zhì)。隨后對影響超聲波提取多糖的5個因素進行研究，即：超聲頻率、物料比、時間、溫度以及pH。通過對單因素的研究獲得正交試驗的基本信息，最終選定物料比、時間、溫度和pH作為正交試驗L<,9>(3<'4>)的四個因子，進行這些因子3個水平上的研究。獲得九種多糖后，測定他們的糖含量、硫酸基含量以及糖醛酸

3、的含量，同時測定它們粘度以及分子量分布情況。通過研究計算獲得超聲波提取多糖的最佳方法，即：A<,2>B<,1>C<,3>D<,2>。使用該方法重新提取多糖，檢測其各項理化指標，并與傳統(tǒng)方法比較顯示，超聲波提取海帶多糖在多糖提取能力上與水和酶的提取能力相當，超過545mg，遠遠高于堿提取法；從粘度和分子量分布看，超聲波提取的海帶多糖的小分子量多糖高于傳統(tǒng)方法提取的海帶多糖，在使用MW100000的超濾膜時，多糖的透過濾接近40﹪；經(jīng)硫酸基

4、含量分析得知該提取方法獲得的海帶多糖的硫酸基含量最高，達到9﹪，高于傳統(tǒng)提取方法，而硫酸基含量的高低以及硫酸基在糖鏈上的位置與海帶多糖的生物活性密切相關，可得知超聲波提取海帶多糖的生物活性理論上應該高于傳統(tǒng)方法。 氣相色譜分析結(jié)果表明，4種提取方法獲得的組成海帶多糖的單糖的成分相同，含量也基本相同。4種海帶多糖經(jīng)DEAE-23離子交換纖維素分離純化，結(jié)果顯示分離結(jié)果也基本相同。使用高效液相色譜對四種多糖分析發(fā)現(xiàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四種多糖