絞股藍多糖的分離純化、結構分析及生物活性研究.pdf

1、絞股藍 Gynostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino是一種藥食同源的多年生草質藤本植物，具有清熱解毒、祛痰止咳等功能，市售以絞股藍茶為主。目前研究熱點主要集中于皂苷類成分的研究。隨著多糖研究的逐漸興起，絞股藍多糖的藥理作用也受到越來越多人的重視。絞股藍中除皂苷外，多糖是一類重要的具有生物活性的大分子物質，因其水溶性更好，生物利用度更高，具有更好的應用前景。本實驗采用低濃度堿對水提后的絞股藍進行提取，分離純

2、化得到一種全新的絞股藍多糖，并對其進行化學結構分析及抗氧化抗炎活性研究。實驗結果如下：
　　1.絞股藍多糖的提取工藝：絞股藍經(jīng)甲醇回流脫脂、熱水萃取后再采用料液比為1:16的0.5 mol/L氫氧化鈉溶液在80℃提取2小時。得到的堿液經(jīng)鹽酸中和后透析，透析液采用雙氧水除色素，乙醇沉淀后氮氣吹干獲得絞股藍粗多糖。
　　2．絞股藍粗多糖的分離純化：絞股藍粗多糖經(jīng)DEAE陰離子交換樹脂與Sephacryl S-400葡聚糖凝膠樹脂

3、分離后，冷凍干燥得到精制多糖 GPP-S。采用HPLC法測定得到 GPP-S純度為99.9％，分子量為1.2×106 Da。
　　3. GPP-S的結構解析：氣相色譜法測定GPP-S單糖組成為鼠李糖：阿拉伯糖：葡萄糖：半乳糖=1:3.72:19.49:7.82，其中葡萄糖含量最高。PMP柱前衍生化法也證明其含有鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖四種單糖，并且不含有葡萄糖醛酸。甲基化氣質聯(lián)用結果顯示 GPP-S的糖苷鍵組成為1,4-G

4、lc：1,4,6-Glc：1,6-Gal：1-Ara=17.1:2.78:1.51:1.00。綜合NMR結果推斷 GPP-S是以1,4-Glc和1,6-Gal為主鏈，每6個1,4-Glc單元有1個1,4,6-Glc分支，且以1-Ara為末端。GPP-S的化學結構如下圖所示。(此處圖片省略）
　　4. GPP-S的生物活性測定：絞股藍具有體外抗氧化及抗炎能力。體外抗氧化實驗表明，絞股藍多糖GPP-S對DPPH?（DPPH自由基）、O