和厚樸酚脂質(zhì)體4周毒代動力學及大鼠腎臟中代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、和厚樸酚（Honokiol），是從中藥厚樸中分離、純化的一種多酚類天然小分子化合物，具有良好的抗腫瘤效果，課題組前期通過體外和體內(nèi)動物試驗證明其對非小細胞肺癌SPC-A1、H460、HCC827、H1975等裸鼠皮下瘤抑制效果顯著，極有可能是治療肺癌的候選藥物，目前處于臨床前研究開發(fā)階段。在前期實驗的基礎(chǔ)上，本文采用UHPLC-MS/MS聯(lián)用技術(shù)、UHPLC-Q-TOF/MS/MS聯(lián)用技術(shù)對和厚樸酚脂質(zhì)體進行臨床前毒代動力學及代謝產(chǎn)物研

2、究。研究內(nèi)容如下：
　　1、Beagle犬血漿樣品中和厚樸酚測定方法的建立與驗證
　　采用超高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿質(zhì)譜法（UHPLC-MS/MS）建立Begale犬血漿中和厚樸酚的檢測方法，并對其進行了系統(tǒng)的方法學驗證。結(jié)果顯示所建立的分析方法專屬性強、線性范圍寬，靈敏度、準確度高，重復性好，滿足生物樣品分析方法的一般準則，可用作和厚樸酚脂質(zhì)體在Beagle犬體內(nèi)毒代動力學研究血漿樣本檢測。
　　2、Beagle犬

3、靜脈滴注和厚樸酚脂質(zhì)體4周毒代動力學研究
　　Beagle犬50只（雌雄各半），隨機分為5組（首次及末次給藥后采樣），分別為和厚樸酚脂質(zhì)體低、中、高3個劑量組、陰性對照品、空白脂質(zhì)體對照組，每組10只。每天給藥1次，連續(xù)給藥4周，分別于首次和末次給藥后采集各時間點血樣，采用UHPLC-MS/MS方法分析血漿樣品。
　　各劑量組首次與末次給藥后Cmax、AUC(0-t)進行統(tǒng)計學比較，結(jié)果顯示，低、中、高劑量組的Cmax與AU

4、C(0-t)統(tǒng)計結(jié)果均存在顯著性差異。和厚樸酚脂質(zhì)體低劑量組、中劑量組和高劑量組的首、末兩次Cmax值的比值分別為0.77、1.22、0.77，AUC(0-t)的比值分別為0.99、1.25、0.70；低劑量組和高劑量組末次與首次給藥后Cmax與AUC(0-t)比值均小于1，中劑量組末次與首次給藥后Cmax與AUC(0-t)比值均大于1，表明多次給藥后，低劑量組和高劑量組的和厚樸酚在Beagle犬體內(nèi)的暴露水平并沒有增加，中劑量組和厚樸

5、酚的暴露水平逐漸增高。各劑量組末次與首次給藥后Cmax與AUC(0-t)比值結(jié)果顯示，HK在4 mg/kg、12 mg/kg和40 mg/kg劑量組幾乎無蓄積。和厚樸酚在4~40 mg/kg劑量范圍內(nèi)具有線性藥代動力學特征。
　　3、和厚樸酚脂質(zhì)體SD大鼠腎臟中的代謝產(chǎn)物鑒定研究
　　主要研究和厚樸酚在腎臟中的代謝特性。腎臟中含有豐富的與藥物代謝相關(guān)Ⅱ相代謝酶，腎臟不僅是藥物及其代謝產(chǎn)物排泄的主要器官，也是藥物代謝的重要器官

6、，研究和厚樸酚在腎臟中的代謝途徑，對于進一步闡明和厚樸酚在體內(nèi)代謝途徑，豐富其代謝產(chǎn)物信息是十分必要的。本實驗采用13C穩(wěn)定同位素標記技術(shù)與UHPLC-Q-TOF-MS/MS聯(lián)用技術(shù)測定經(jīng)尾靜脈給藥和厚樸酚脂質(zhì)體后大鼠腎臟中的和厚樸酚代謝產(chǎn)物。最終，在大鼠腎臟中樣品發(fā)現(xiàn)了19個代謝產(chǎn)物并對其結(jié)構(gòu)進行鑒定，與尿液、血液、糞便中的代謝物相比，發(fā)現(xiàn)了4個新的硫酸酯代謝產(chǎn)物，提出了和厚樸酚在腎臟中的主要代謝途徑為硫酸化。本研究豐富了和厚樸酚的代