炎癥性水液代謝障礙動物模型的共性機制研究.pdf

1、目的：建立急性肺損傷(acute lung injury，ALI)、急性胃潰瘍(acute gastric ulcer，AGU)和慢性腎衰竭(chronic renal failure，CRF)等炎癥性水液代謝障礙動物模型，觀察這三種模型的炎癥因子和水通道蛋白（aquaporins，AQPs）的表達，并用相應(yīng)藥物進行干預(yù)，探討不同病因炎癥性水液代謝障礙的共性機制，為炎癥性水液代謝障礙的治療方案和藥物研究提供基礎(chǔ)。
　　方法：取6-

2、8周齡雄性Wistar大鼠，分別采用尾靜脈注射內(nèi)毒素(Lipopolysaccharide，LPS)法、灌服無水乙醇法和灌服腺嘌呤混懸液法建立急性肺損傷、急性胃潰瘍和慢性腎衰竭大鼠模型，各模型均分為3組，即正常對照組、模型對照組、藥物干預(yù)組，藥物干預(yù)組分別用地塞米松、雷尼替丁和醋酸潑尼松進行藥物干預(yù)。觀察大鼠體征及精神狀態(tài)，檢測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、C反應(yīng)蛋白(CRP)和白介素6（IL-6）等血清炎癥因子;并處死大鼠，分別觀察

3、相應(yīng)靶器官的水腫情況，稱重，取同一部位組織作HE染色和免疫組化染色，進行組織病理學(xué)觀察，采用熒光定量PCR和Western Blotting方法檢測靶器官組織中AQPs mRNA表達和蛋白表達。
　　結(jié)果：(1)與正常對照組比較，急性肺損傷模型組大鼠肺指數(shù)明顯升高(P＜0.05)，血清TNF-α、CRP和IL-6含量顯著上升(P＜0.05);病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠肺泡間隔明顯增寬，間質(zhì)內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞浸潤，免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)陽

4、性物質(zhì)AQP1、AQP5表達明顯減少;分子檢測結(jié)果，肺組織AQP1、AQP5 mRNA和蛋白表達量均有不同程度的降低，其中AQP1、AQP5 mRNA表達量呈顯著性差異(P＜0.05);地塞米松干預(yù)后大鼠體征和精神狀態(tài)有改善，肺指數(shù)明顯下降(P＜0.05)、血清TNF-α、CRP和IL-6含量均顯著性降低(P＜0.05)，肺組織病理狀況有所改善，肺組織AQP1、AQP5 mRNA表達量和蛋白表達均顯著上升（P＜0.05）。(2)與正常對

5、照組相比，急性胃潰瘍模型組大鼠胃指數(shù)明顯升高(P＜0.05)，血清TNF-α和IL-6含量均顯著升高(P＜0.05);胃黏膜較正常組層次模糊，部分黏膜表層呈現(xiàn)缺損，可見炎性細(xì)胞浸潤;免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)陽性物質(zhì)AQP1表達減少、AQP3表達增加，而分子檢測發(fā)現(xiàn)胃組織AQP1、AQP3 mRNA表達均有升高趨勢(P＞0.05)，AQP1、AQP3蛋白表達無明顯變化（P＞0.05）;雷尼替丁干預(yù)后，大鼠胃指數(shù)明顯下降(P＜0.05)，血清TNF

6、-α和IL-6含量顯著性降低(P＜0.05);胃組織病變有明顯改善，未見炎性細(xì)胞浸潤，免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)陽性物質(zhì)AQP1表達增加、AQP3表達減少，而分子檢測發(fā)現(xiàn)胃組織AQP3 mRNA、蛋白表達量呈減少趨勢（P＞0.05），而AQP1 mRNA和蛋白表達量有升高趨勢(P＞0.05)。(3)慢性腎衰竭模型組大鼠腎指數(shù)明顯升高(P＜0.05)，血清TNF-α、CRP和IL-6含量明顯升高（P＜0.05），腎小管較正常組擴張嚴(yán)重，間質(zhì)內(nèi)可見深

7、色結(jié)晶體并且腎小球破壞嚴(yán)重，周圍組織發(fā)生玻璃樣變，可見炎性細(xì)胞浸潤，免疫組化結(jié)果陽性物質(zhì)AQP1表達減少、AQP2表達增加，腎組織AQP1 mRNA、蛋白表達量顯著降低(P＜0.05)，AQP2蛋白表達量顯著升高（P＜0.05），而AQP2 mRNA表達無明顯變化（P＞0.05）;醋酸潑尼松干預(yù)后腎指數(shù)和血清CRP含量有下降趨勢(P＞0.05)，大鼠腎小球形態(tài)較清晰完整，免疫組化結(jié)果陽性物質(zhì)AQP1表達增加、AQP2表達減少，腎組織AQ