實驗性炎癥性腸病動物模型的建立及川芎嗪藥物干預研究.pdf

1、目的:炎癥性腸?。↖nflammatory bowel disease，IBD）包括克羅恩?。–rohn’s disease，CD）和潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis，UC），是一種病因未明的慢性非特異性腸道炎癥性疾病，具有慢性和反復發(fā)作的特點，在我國普遍流行。本研究擬分別建立CD和UC的動物模型并對兩種動物模型進行驗證，同時給予川芎嗪藥物干預，以研究川芎嗪對實驗性腸炎是否有治療作用及其可能的分子機制。
　　方法

2、：分別建立TNBS誘導的CD大鼠模型和惡唑酮誘導的UC小鼠模型，并通過對病變腸段進行組織損傷評分、流式分析外周血中Th1細胞和Th2細胞的數(shù)量及比例判斷造模結(jié)果。通過基因芯片技術(shù)和Western Blot驗證兩種模型中差異表達的基因。使用不同劑量的川芎嗪對CD模型的大鼠和UC模型的小鼠進行藥物干預，分別獲取其SMC、PBMC和LPMC，流式分析Th1細胞和Th2細胞的比例，Annexin V法檢測細胞凋亡率，并抽提LPMC的總RNA，R

3、T-PCR法檢測IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-33、VCAM-1、IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-ɑ、ICAM-1、iNOS、NF-κB、NF-AT、 AP-1和 P-selectin等多種細胞因子的表達差異。
　　結(jié)果：我們成功建立了CD大鼠模型和UC小鼠模型，并改良了CD的建模方法，證實了TNBS誘導的CD大鼠模型是一種以Th1亞群細胞占優(yōu)勢的腸粘膜局部免疫紊亂的模型，而惡唑酮誘導的UC模型是一種

4、以Th2亞群細胞占優(yōu)勢的腸黏膜局部免疫紊亂的模型。我們通過基因芯片和WB發(fā)現(xiàn)在CD模型中，TSC-22、STAT3、IFITM1和PAI-2的表達是上調(diào)的，Galectin-9和MIP-1a的表達是下調(diào)的；在UC模型中，IgHG3、PAI-2和NOS2A的表達是上調(diào)的，MDR1、HGF和PXR的表達是下調(diào)的。我們發(fā)現(xiàn)2mg/ml的川芎嗪能顯著抑制 CD模型的大鼠和 UC模型的小鼠的P-selectin的表達、促進LPMC的凋亡，并分別抑