實驗性癌性惡病質(zhì)的藥物干預(yù)研究.pdf

1、目的：本實驗旨在通過建立癌性惡病質(zhì)動物模型，比較吲哚美辛、沙立度胺、魚油、吲哚美辛+魚油和營養(yǎng)支持治療對癌性惡病質(zhì)的療效。實驗觀察了小鼠營養(yǎng)指標(biāo)(總蛋白、血糖、膽固醇和甘油三脂)、細(xì)胞因子(TNF-α，IL-6)和脾臟NF-κB的活性的變化，對各種藥物的療效及其機制進行了初步探討。 方法：將鼠結(jié)腸腺癌26(colon26)細(xì)胞株接種于BALB/c小鼠右上肢腋下皮下，建立癌性惡病質(zhì)動物模型。將80只雄性BALB/c小鼠隨機分成8組

2、：健康對照組(HC)、癌性惡病質(zhì)組(CC)、醋酸甲羥孕酮組(MPA)、吲哚美辛組(IND)、沙立度胺組(TLD)、魚油組(EPA)、魚油和吲哚美辛聯(lián)合組(EPA+IN)以及營養(yǎng)支持組(NS)。各治療組用藥一周，監(jiān)測小鼠體重、攝食量及飲水量的變化。應(yīng)用全自動生化分析儀測定血漿各營養(yǎng)代謝指標(biāo)；采用放射免疫分析法測定血漿TNF-α、IL-6的水平；采用免疫組織化學(xué)方法測定脾臟組織NF-κB的活性。用SPSS12.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理，各組

3、數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)的形式表示。兩個獨立樣本組間均數(shù)比較用t檢驗，多組間均數(shù)差異性比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)。 結(jié)果： 1、動物模型 小鼠接種colon26腫瘤細(xì)胞3-5天后，可以觸及到瘤體，荷瘤小鼠精神變差、活動減少，但攝食、飲水量變化不明顯。2周后瘤體長至1.5cm3，荷瘤小鼠出現(xiàn)消瘦、精神極差、皮毛毛糙雜亂、行動遲緩，攝食、飲水量相對減少。所有治療組小鼠治療3、4天后精神

4、有所好轉(zhuǎn)，行動漸靈活，攝食、飲水量相對增多，毛發(fā)稍有光澤，瘤體體積未見明顯變化。 2、去瘤體重及瘤體重量 接種腫瘤細(xì)胞后，荷瘤小鼠去瘤體重逐漸下降，第15天時，荷瘤小鼠平均去瘤體重較健康組明顯降低(P<0.05)，即荷瘤小鼠進入惡病質(zhì)狀態(tài)。第23天處死小鼠，所有荷瘤小鼠平均去瘤體重顯著低于健康組(P<0.001)，所有治療組小鼠平均去瘤體重均較惡病質(zhì)組小鼠去瘤體重增加，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，其中營養(yǎng)支持組小鼠平

5、均去瘤體重低于吲哚美辛和魚油組(P<0.05)。所有荷瘤小鼠腫瘤重量之間相比無差別(P>0.05)。 3、生化指標(biāo)本實驗中，惡病質(zhì)組小鼠血漿總蛋白較健康小鼠無明顯降低(P>0.05)，但其血糖顯著降低、甘油三脂和膽固醇顯著升高(P<0.05)。 吲哚美辛組小鼠血糖水平高于惡病質(zhì)組(P<0.05)，與醋酸甲羥孕酮組無明顯差異(P>0.05)；營養(yǎng)支持組小鼠血糖水平與惡病質(zhì)組無明顯差異(P>0.05)；魚油、沙立度胺、魚油和

6、吲哚美辛聯(lián)合組小鼠血糖水平高于惡病質(zhì)組，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 沙立度胺、魚油以及魚油和吲哚美辛聯(lián)合組小鼠血漿甘油三脂水平均明顯低于惡病質(zhì)組(P<0.05)，而吲哚美辛、營養(yǎng)支持組小鼠血漿甘油三脂水平與惡病質(zhì)組無明顯差別(P>0.05)，其中沙立度胺、魚油組小鼠血漿甘油三脂水平與醋酸甲羥孕酮組無明顯差別(P>0.05)，魚油和吲哚美辛聯(lián)合組小鼠血漿甘油三脂水平低于醋酸甲羥孕酮組(P<0.05)。所有治療組小鼠血漿膽固醇

7、水平較惡病質(zhì)組均明顯降低(P<0.05)，其中魚油以及魚油聯(lián)合吲哚美辛組小鼠血漿膽固醇水平最低，且低于醋酸甲羥孕酮組(P<0.05)，沙立度胺組小鼠血漿膽固醇水平高與醋酸甲羥孕酮組(P<0.05)，吲哚美辛、營養(yǎng)支持組小鼠血漿膽固醇水平與醋酸甲羥孕酮組無差別(P>0.05)。 4、細(xì)胞因子惡病質(zhì)組小鼠血漿TNF-α、IL-6水平較健康組顯著升高(P<0.05)。吲哚美辛、魚油、魚油聯(lián)合吲哚美辛、沙立度胺和營養(yǎng)支持組小鼠血漿TNF

8、-α水平均顯著低于惡病質(zhì)組(P<0.05)，但與醋酸甲羥孕酮無明顯差異(P>0.05)。其中魚油、魚油聯(lián)合吲哚美辛及沙立度胺組血漿TNF-α水平低于吲哚美辛和營養(yǎng)支持組(P<0.05)。所有治療組小鼠血漿IL-6水平均較惡病質(zhì)組顯著降低(P<0.05)，其中營養(yǎng)支持組小鼠血漿IL-6水平高于醋酸甲羥孕酮組(P<0.05)，其它治療組小鼠血漿IL-6水平均較醋酸甲羥孕酮組無明顯區(qū)別(P>0.05)。 5、脾臟NF-κB活性惡病質(zhì)組

9、小鼠脾臟NF-κB活性較健康組顯著增強(P<0.05)；吲哚美辛、魚油、魚油聯(lián)合吲哚美辛、沙立度胺組小鼠脾臟NF-κB活性較惡病質(zhì)組均顯著減弱(P<0.05)，且它們之間相比無差異(P>0.05)；營養(yǎng)支持組小鼠脾臟NF-κB活性與惡病質(zhì)組無明顯差異(P>0.05)。細(xì)胞因子濃度與脾臟NF-κB活性呈正性相關(guān)。 6、腫瘤病理組織觀察鏡下觀：腫瘤細(xì)胞彌漫分布，排列紊亂；腫瘤細(xì)胞大小不一，形態(tài)不規(guī)則，可見瘤巨細(xì)胞；核大、深染，核分裂

10、象增多，可見病理性核分裂，核漿比例增大。 結(jié)論： 1、小鼠進入癌性惡病質(zhì)狀態(tài)后體重明顯減輕(大于5％)，同時伴精神差、活動減少、攝食及飲水量減少等綜合征。 2、癌性惡病質(zhì)小鼠存在明顯的營養(yǎng)不良和代謝紊亂，血漿IL-6、TNF-α水平升高，脾臟NF-κB活性增強。 3、各種藥物的干預(yù)對去瘤體重的增加無明顯作用。 4、各種藥物的干預(yù)均不能改善癌性惡病質(zhì)的低蛋白狀態(tài)。 5、吲哚美辛升高CC小鼠血

11、糖的作用最強，但不優(yōu)于醋酸甲羥孕酮；魚油和吲哚美辛聯(lián)合降低CC小鼠血漿甘油三脂水平最強，且優(yōu)于醋酸甲羥孕酮；魚油以及魚油聯(lián)合吲哚美辛降低CC小鼠血漿膽固醇水平最強，且優(yōu)于醋酸甲羥孕酮。 6、在降低TNF-α方面，各治療組均有效，但弱于醋酸甲羥孕酮組。在降低IL-6方面，各治療組均有效，營養(yǎng)支持組弱于醋酸甲羥孕酮組，其余各組較醋酸甲羥孕酮組無明顯區(qū)別。 7、癌性惡病質(zhì)狀態(tài)下，脾臟NF-κB活性明顯增強，除營養(yǎng)支持組外各治療