2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、細(xì)胞自噬是一種在進(jìn)化上高度保守的、維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的生理過(guò)程,可以使細(xì)胞內(nèi)部的長(zhǎng)壽命蛋白、受損的細(xì)胞器等通過(guò)溶酶體降解。自噬與去除和降解錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有著重要的聯(lián)系,然而對(duì)于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在受到脅迫時(shí)如何引發(fā)和調(diào)控自噬的分子機(jī)制還不是完全清楚。很多研究表明磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)和雷帕霉素靶蛋白質(zhì)(TOR)在自噬的調(diào)控中起著關(guān)鍵的作用。自噬對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、再生、退行性疾病等的調(diào)控已經(jīng)被廣泛研究,但是在靜息的細(xì)胞中,

2、自噬調(diào)控的方式仍不清楚。
  由于鹵蟲(chóng)在環(huán)境惡劣的條件下可以產(chǎn)生長(zhǎng)時(shí)間靜息的休眠胚胎,因此我們選擇鹵蟲(chóng)作為研究模型。我們發(fā)現(xiàn),卵生途徑中,休眠胚胎形成前期,自噬水平逐漸升高,而在休眠胚胎中自噬基本檢測(cè)不到。Western blotting和RNA干涉檢測(cè)的結(jié)果表明,卵生鹵蟲(chóng)自噬并不是AMPK/TOR調(diào)控的。同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)與應(yīng)激相關(guān)的小分子轉(zhuǎn)錄因子p8(At-p8)的表達(dá)特征與休眠胚胎形成過(guò)程中自噬的變化水平相一致,在休眠胚胎形成前期

3、高量表達(dá),但是在休眠胚胎中消失,暗示Ar-p8很可能與休眠胚胎形成過(guò)程中的自噬調(diào)控相關(guān)。使用雙鏈RNA將休眠胚胎形成前期的Ar-p8干涉后,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組高水平的自噬相比,干涉Ar-p8組自噬降低,同時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬相關(guān)的分子轉(zhuǎn)錄因子4(ATF4)和轉(zhuǎn)錄因子6(ATF6)降低。進(jìn)一步我們?cè)谌宋赴┘?xì)胞系MKN45中過(guò)表達(dá)Ar-p8和人源轉(zhuǎn)錄因子p8(Hu-p8),發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)Ar-p8和Hu-p8后腫瘤細(xì)胞自噬水平升高,但是AMPK/mTOR信號(hào)

4、通路并不發(fā)生變化。同時(shí),我們分別使用平衡鹽緩沖液(EBSS)和棕櫚酸(PA)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行脅迫處理,得到營(yíng)養(yǎng)缺乏和脂肪毒性脅迫的細(xì)胞,引發(fā)自噬。Western blotting的結(jié)果顯示AMPK/mTOR參與調(diào)控由營(yíng)養(yǎng)缺乏引發(fā)的自噬,而脂肪毒性引發(fā)的自噬則是經(jīng)由Hu-p8調(diào)控的。進(jìn)一步的研究顯示,AMPK/mTOR參與調(diào)控parkin介導(dǎo)的線(xiàn)粒體自噬,而Hu-p8參與調(diào)控由PERK/ATF6介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬。最后我們的研究確認(rèn)了一條由細(xì)胞脂

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