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文檔簡介
1、轉錄因子NF-κB家族在許多基因的表達調(diào)控中起著重要作用,在淋巴細胞的活化和增殖過程,特別是在炎癥過程中,也都起著重要調(diào)控作用。NF-κB家族一共有5個成員,但只有p65、RelB以及c-Rel亞型具有轉錄激活結構域。通常在未激活的細胞中,NF-κB與其抑制蛋白IκB結合而失去活性并存在于細胞質(zhì)中。當細胞受到刺激而被激活后,IκB被降解NF-κB被釋放并轉移到細胞核從而調(diào)控下游基因的轉錄。Quinacrine(QC)是一種抗瘧疾藥物,同
2、時也具備抗炎抑癌作用,實驗研究中多用QC作為NF-κB的抑制劑使用。AGGF1是新近發(fā)現(xiàn)的一個血管生成因子,而最近的研究中指出AGGF1可作為抗炎因子存在。AGGF1同時具備促腫瘤生長和抑制腫瘤生長的兩種對立的功能,這使得對其體內(nèi)的轉錄調(diào)控機制的研究變得尤為重要。在對AGGF1啟動子區(qū)進行生物信息學分析發(fā)現(xiàn),其啟動子區(qū)存在NF-κB的潛在結合位點。通過熒光素酶實驗分析發(fā)現(xiàn),p65能夠通過兩個結合位點結合到AGGF1啟動子區(qū)并增強其轉錄活
3、性。在過表達p65時,AGGF1啟動子活性增強近30倍,而對其中兩個位點進行突變后,其活性顯著減弱,分別降低約61%和87%。且用sip65和QC處理后,AGGF1啟動子活性也顯著減弱。在對AGGF1的RNA和蛋白表達量進行分析后發(fā)現(xiàn),p65能增強AGGF1的RNA量及蛋白表達量。過表達p65時,AGGF1的RNA表達量增加1.9倍且其蛋白量也有增多。而用sip65和QC處理后,AGGF1的RNA和蛋白表達量顯著減少。這些實驗數(shù)據(jù)表明,
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