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文檔簡介
1、雌激素對心肌細胞缺氧/復(fù)氧損傷具有保護作用,但其確切機制尚未完全闡明。引起心肌細胞損傷的眾多因素中,鈣超載的發(fā)生和NF—κB的活化是心肌缺血/灌注損傷發(fā)生的重要因素。缺氧/復(fù)氧損傷中NF—κB被激活,其是否與鈣超載的發(fā)生有關(guān)系仍未知。本研究主要探討雌激素對心肌細胞缺氧/復(fù)氧中NF—κB及鈣離子的影響及NF—κB和鈣離子在缺氧/復(fù)氧中相關(guān)性的研究。 本研究建立乳鼠心肌細胞缺氧/復(fù)氧損傷模型,以噻唑蘭和流式細胞儀測細胞凋亡率及乳酸脫
2、氫酶,肌酸激酶,丙二醛等生化指標作為鑒定模型是否成功的指標,以免疫熒光技術(shù)檢測鈣離子濃度,蛋白質(zhì)印跡定量分析NF—κB p65蛋白,觀察二者在損傷過程中的變化及雌激素的作用。通過流式細胞儀技術(shù)和免疫組化手段分別測定不同時間缺氧/復(fù)氧損傷的鈣離子和NF—κB p65蛋白表達量,通過Pearson相關(guān)性分析確定二者相關(guān)性。選取同一復(fù)氧時間,予鈣離子抑制劑尼福地平與吡咯烷二硫基甲酸鹽預(yù)處理后,激光共聚焦觀察鈣離子和NF—κB p65蛋白。
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