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文檔簡介
1、目的:本研究初步探討β2-腎上腺素受體(β2-adrenoceptor,β2-AR)是否介導(dǎo)了雌激素對(duì)大鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的保護(hù)作用。
方法:成年雌性SD大鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham),雙側(cè)卵巢切除組(Ovx)和雙側(cè)卵巢切除后補(bǔ)充17β-雌二醇組(Ovx+E2)。首先,分離并培養(yǎng)Sham組大鼠心肌細(xì)胞,在細(xì)胞水平建立缺氧/復(fù)氧損傷模型,測(cè)定其異丙腎上腺素刺激(isoproterenol,ISO)狀態(tài)下的收縮幅度。
2、其次,分離并培養(yǎng)Sham組大鼠心肌細(xì)胞,進(jìn)行缺氧、復(fù)氧,缺氧、復(fù)氧期間分別加入選擇性β2-AR拮抗劑ICI118,551,通過測(cè)定各組單個(gè)心肌細(xì)胞收縮幅度、培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶(LDH)含量、心肌細(xì)胞桿狀率,觀察心肌細(xì)胞收縮儲(chǔ)備、心肌損傷、心肌細(xì)胞存活率。最后,分離并培養(yǎng)Sham、Ovx、Ovx+E2三組大鼠心肌細(xì)胞,缺氧期間加入選擇性β2-AR拮抗劑ICI118,551,分別測(cè)定各組單個(gè)心肌細(xì)胞收縮幅度、培養(yǎng)基中LDH的含量、心肌細(xì)胞桿
3、狀率以觀察上述指標(biāo)。
結(jié)果:在Sham組中,缺氧3h,顯著降低了單個(gè)心肌細(xì)胞收縮幅度;復(fù)氧3h,使收縮幅度進(jìn)一步降低;復(fù)氧6h以后,收縮幅度恢復(fù)至正常水平。缺氧期間,選擇性β2-AR拮抗劑ICI118,551顯著上調(diào)了Sham組單個(gè)心肌細(xì)胞的收縮幅度,增加了培養(yǎng)基中LDH含量,降低了心肌細(xì)胞的存活率;而復(fù)氧期間無上述變化。缺氧期間,與Sham相比,Ovx上調(diào)了單個(gè)心肌細(xì)胞的收縮幅度,增加了培養(yǎng)基中LDH含量,降低了心肌細(xì)胞
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