五甲基槲皮素預(yù)處理對(duì)心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)機(jī)制研究

1、分類(lèi)號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：406522511355南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文五甲基槲皮素預(yù)處理對(duì)心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)機(jī)制研究五甲基槲皮素預(yù)處理對(duì)心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)機(jī)制研究Effectofpretreatmentwithpentamethylquercetinagainstcardiomyocytesanoxiareoxygenationinjury萬(wàn)青培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)藥學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱(chēng)：何明、教授申請(qǐng)學(xué)

2、位的學(xué)科門(mén)類(lèi)：醫(yī)學(xué)學(xué)科專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)：藥理學(xué)論文答辯日期：2014年6月答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：年月日萬(wàn)方數(shù)據(jù)摘要I摘要目的目的：槲皮素甲基化改造得到的五甲基槲皮素（PMQ），對(duì)心肌缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)采用原代SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞，建立心肌缺氧復(fù)氧（anoxiareoxygenationAR）損傷模型，探討五甲基槲皮素預(yù)處理對(duì)大鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)作用及其對(duì)線粒體功能的影響。方法方法：培養(yǎng)原代SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞，隨機(jī)分

3、為8組，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次：（1）正常對(duì)照組（Cont）；（2）ContDMSO組；（3）缺氧復(fù)氧組（AR）；（4）ARDMSO組；（5）缺氧預(yù)適應(yīng)的延遲相組（DPC）；（6）10μmolLPMQAR組；（7）30μmolLPMQAR組；（8）100μmolLPMQAR組。用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞存活率Beckman生化自動(dòng)分析儀檢測(cè)培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性，酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定各組脂質(zhì)過(guò)氧化物丙二醛（MDA）含量、抗氧化物酶（SOD

4、）活性、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSHPx）的活性；流式細(xì)胞法檢測(cè)線粒體膜電位（Δψm）以及細(xì)胞凋亡情況、線粒體腫脹法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mPTP)開(kāi)放情況。結(jié)果結(jié)果：與Cont組相比，AR組的各項(xiàng)指標(biāo)均顯示細(xì)胞凋亡增加（P0.01）說(shuō)明AR模型構(gòu)建成功；與AR組相比，DPC組的各項(xiàng)指標(biāo)均顯示細(xì)胞凋亡減少，說(shuō)明DPC模型構(gòu)建成功（P0.01）；與AR組相比，不同劑量PMQ(1030100μmolL)預(yù)處理24h組，其呈現(xiàn)劑量

5、依賴性的使LDH活性降低、細(xì)胞存活率增加、MDA含量顯著減少、SOD酶活性顯著上升、GSHPx酶活性顯著上升、細(xì)胞凋亡減少（P0.05或P0.01）；與AR組相比，30100μmolLPMQ預(yù)處理24h組，其線粒體膜電位更為穩(wěn)定、mPTP開(kāi)放減少（P0.05或P0.01）。結(jié)論結(jié)論：PMQ預(yù)處理24h后，可產(chǎn)生藥理性延遲保護(hù)作用，其作用機(jī)制與抑制氧化應(yīng)激、穩(wěn)定線粒體膜電位、抑制mPTP開(kāi)放，進(jìn)而減少細(xì)胞凋亡有關(guān)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：五甲基槲皮