麝香保心丸對缺氧復氧心肌細胞的保護及作用機制研究.pdf

1、麝香保心丸豐治心肌缺血引起的心絞痛、胸悶及心肌梗死，是目前國內(nèi)臨床上廣泛應用于治療冠心病的特效復方藥物。雖然該復方基于整體動物和組織器官水平的藥理研究已經(jīng)取得了一定的進展，但遠不足以闡明復方作用機制。為了進一步闡明中藥復方的分子作用機制及其可能作用靶點和通路，本論文在已有工作的基礎上，初步探討麝香保心丸及其豐要藥效物質(zhì)對缺氧心肌細胞的保護作用，并采用基因組學技術(shù)解釋麝香保心丸治療冠心病的分子作用機制。
　　 為了研究麝香保心丸對

2、心肌細胞缺氧/復氧(H/R)損傷的保護作用，本課題用原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞建立H/R的損傷模型，采用MTT法測定細胞的存活率以評價麝香保心丸的藥效。實驗結(jié)果表明，麝香保心丸在30、50、100、150μg/ml劑量時，對心肌細胞缺氧/復氧(H/R)損傷有保護作用。同時，采用MTT法研究了麝香保心丸復方中的20個主要活性成分對心肌細胞缺氧/復氧(H/R)損傷的保護作用。實驗結(jié)果表明，人參皂苷Rb1、Rb2、蟾毒靈和麝香酮在10μM

3、時表現(xiàn)出較好活性(P＜0.05)。為了進一步研究麝香保心丸對心肌細胞H/R損傷保護的作用機制，本研究對活性成分人參皂苷Rb1干預后的缺氧/復氧(H/R)心肌細胞進行了基因芯片研究，差異基因表達譜結(jié)果顯示，H/R組與正常組比較有38個差異基因，16個上調(diào)，22個下調(diào);給藥組與H/R組比較有8個差異基因，6個上調(diào)，2個下調(diào);其中由人參皂苷Rb1調(diào)控的基因有5個，分別是Sec11c、Ankrd11、Zfp70911、Sco1和ND6。通過生物

4、信息學的分析將這些基因歸到所調(diào)控的通路上，兩兩對比之后推測出人參皂苷Rb1保護缺氧復氧心肌的可能途徑主要有以下幾條:通過代謝、氧化磷酸化或是帕金森疾病通路對缺氧復氧中造成的ND6低表達進行了逆轉(zhuǎn);通過蛋白輸出通路對缺氧復氧中造成的Sec11c低表達進行了逆轉(zhuǎn);對缺氧復氧中造成的Ankrd11、Zfp70911和Sco1的低表達進行逆轉(zhuǎn)，或是這些途徑共同調(diào)節(jié)的結(jié)果。研究結(jié)果有待進一步實驗驗證。
　　 本課題探討了麝香保心丸對心肌細