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1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文核轉(zhuǎn)錄因子（NF）κB誘捕物對(duì)SKOV3細(xì)胞NFκB活性和成瘤性的影響姓名：陸建萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：孫紅20030401InfluenceofTranscriptionFactorKBDecoyTransfectiononNFKBActivityandTumorigenicityinNudeMiceofSKOV3CellLineAbstract[Objectives]Toinvestigate
2、whetherNF—KBdecoyoligodeoxynuleotides(ODNs)changestheSKOV3cellline’SNF—KBactivityVEGF／uPA／ICAM一1expressionandtumorigenicityinnudemiceinordertoevaluateNFKBasapotentialtargetforovariancancer【Methods]1Thetransfectionefficie
3、ncytoSKOV3cellsoftheNF—KBdecoyODN——cationicliposome—protaminecomplex(1uM)withdifferentchargeratioweremeasuredbyflowcytometry(FCMlandfluorescencemeter2ThedirecteffectofNF—KBdecoyODNstransfecfion011thegrowthofSKOV3cellsinv
4、itrowasmeasuredbyMTTmethod3AftertransfectedwitllNFKBdecoyODNstheSKOV3cellswerestimulatedbyIL1且andculturedfor6，12，24，48hTheNF—KBDNAbindingactivitywasmeasuredbygelmobilityshiftassayandthemRNAlevelofICAM一1／uPA／VEGFwasmeasur
5、edbyRTPCRandVEGFlevelinsupematantwasmeasuredbyELISAkit4ThefemalenudemicewereimplantedbySKOV3cellstransfectedbyNF—KBdecoy0DNsorScrambledODNSandt11eirtumorgrowthandsurvivalwereobserved[Results]1TheefficiencyofLPD(positive／
6、negativechargeratio=4)transfectiontoSKOV3cellsWas9641％，significantlyhigherthanthatofnakedDNAtransfectionwhichwasonly1286％fP0001)and10％novelbovinescrine(NBS)didn’taffecttheefficiency2ThegrowthofSKOV3cellswasnotaffectedby4
7、8hincubationafterNF—KBdecoyODNorscrambledODNtransfectioninvitro3SKOV3cellsexpressedconstitutiveNF—KBDNAbindingactivityandtheactivationofIL—lBresultedinasignificantincreaseofitsactivityTheNF—KBdecoyODNtransfectionsignific
8、antlydecreasedconstitutivelevel(onlyat6hs)andactivatedlevelbyIL一1Binvi仃o4TheactivatedmRNAlevelofuPA、VEGF、ICAM一1andtheVEGFlevelinthesupematantWassignificantlyinhibitedbyNFKBdecoyODNtransfectionespeciallyat6hraftertransfec
9、tioninvitro5Themeansurvivaldatewasprolongedfrom3838days(controlgroup)，3650days(scrambledODNtransfectiongroup)to6188daysfNFKBdecoyODNtransfectiongroup)althoughthetumorigenicityratewasnotdownregulated[Conclusions]1LPDmetho
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